Питательная среда уреаплазма – 50 предназначена для одноэтапного обнаружения, идентификации и полуколичественной оценки титра Ureaplasma urealyticum (U. u.) в течение 1 - 2 cут. Питательная среда уреаплазма – 50 может быть использована в качестве транспортной среды.
Набор питательной среды уреаплазма – 50 рассчитан на проведение от 24 до 48 определений при качественном анализе или от 12 до 16 определений при полуколичественной оценке титра в трех разведениях.
См. статью: Антибиотики для лечения уреаплазмоза
Питательная среда уреаплазма – 50 обеспечивает оптимальные условия для роста U. u. Селективные компоненты, входящие в состав питательной среды уреаплазма – 50, подавляют рост простейших, грибов, большинства представителей бактериальной флоры и других микоплазм, кроме U. u. В процессе роста U. u. в питательной среде уреаплазма – 50 образуются щелочные продукты метаболизма. Это приводит к изменению рН питательной среды уреаплазма – 50, что проявляется в изменении цвета рН-индикатора от желтого до красного или красно-малинового.
См. статью: Культуральная диагностика микоплазмоза и уреаплазмоза
Во флакон с лиофилизированной средой для U. u. уреаплазма – 50 добавить 50 мл дистиллированной воды. Содержимое флакона перемешать до полного растворения (в течение 1 мин.). Полученный прозрачный раствор желтого цвета разлить по 0,9 мл в пробирки для микропроб, закрыть и хранить в холодильнике при температуре 4 - 8 °С до 7 сут. или в морозильнике при температуре ниже минус 4 °С до 2 мес.
Перед проведением анализа пробирки с питательной средой уреаплазма – 50 выдержать при температуре 18 - 25 °С в течение 1 ч. Раствор в пробирках должен быть прозрачным, желтого цвета. В случае помутнения раствора или изменения его цвета пробирки с питательной средой уреаплазма – 50 в работе не использовать.
Для обнаружения U. u. пригодны следующие биологические материалы: отделяемое влагалища, отделяемое шейки матки, отделяемое уретры, сперма, моча и др. Забор проб осуществлять с помощью ложки Фолькмана или одноразового тампона (щетки). Исследуемую пробу вносить в пробирки, содержащие 0,5 мл транспортной среды "микоплазма-Т" или 0,5 мл питательной среды "уреаплазма-среда", производства НИИЭМ им. Пастера. Пробирки с пробами закрыть, промаркировать и доставить в лабораторию. Время транспортировки не должно превышать 8 - 12 ч при температуре не выше 10 - 12 °С.
В лаборатории перенести 100 мкл раствора из пробирки с пробой в пробирку, содержащую 0,9 мл жидкой питательной среды для U. u. уреаплазма – 50.
В зависимости от целей исследования дальнейший анализ может быть проведен в варианте качественного анализа или в варианте полуколичественной оценки титра.
Пробирки с исследуемыми пробами и одну пробирку без пробы (контроль питательной среды) поместить в термостат при температуре 37 ±1 °С. Учет результатов проводить через 24 ч. Окончательный учет результатов проводят через 48 ч.
Положительным результатом "+" считается появление красной или красно-малиновой окраски питательной среды уреаплазма – 50 в пробирке с исследуемой пробой при сохранении желтой (исходной) окраски в контрольной пробирке. Отсутствие изменения окраски питательной среды уреаплазма – 50 "-" в исследуемой пробе по сравнению с окраской питательной среды уреаплазма – 50 в контрольной пробирке оценивается как отрицательный результат.
Для полуколичественной оценки титра делают два последовательных разведения исследуемой пробы с шагом 10. Для этого исходную пробирку с пробой, обозначенную К(+++), встряхнуть и перенести из нее 100 мкл исследуемого материала в другую пробирку, обозначенную К(++) и содержащую 0,9 мл питательной среды для U. u. уреаплазма – 50, что соответствует разведению в 10 раз. Затем перенести 100 мкл раствора из пробирки К(++) в пробирку, обозначенную К(+) и содержащую 0,9 мл питательной среды для U. u. уреаплазма – 50, что соответствует разведению исследуемой пробы в 100 раз.
Три пробирки с пробами К(+++), К(++) и К(+) и одну без пробы, обозначенную К(-) и содержащую 0,9 мл питательной среды для U. u. уреаплазма – 50, поместить в термостат при температуре 37 ±1 °С. Результаты анализа учитывать через 24 ч. Окончательный учет результатов проводить через 48 ч.
Появление красной или красно-малиновой окраски питательной среды уреаплазма – 50 только в пробирке К(+++) при отсутствии изменений окраски питательной среды уреаплазма – 50 в пробирках К(++), К(+) и К(-) указывает на то, что титр U. u. составляет не более 102 колониеобразующих единиц в мл (КОЕ/мл). Появление красной или красно-малиновой окраски питательной среды уреаплазма – 50 в двух пробирках К(+++) и К(++) при отсутствии окраски питательной среды уреаплазма – 50 в пробирках К(+) и К(-) указывает на то, что титр U. u. составляет не более 103 КОЕ/мл. Появление красной или красно-малиновой окраски питательной среды уреаплазма – 50 в трех пробирках К(+++), К(++) и К(+) при отсутствии окраски питательной среды уреаплазма – 50 в пробирке К(-) свидетельствует о том, что титр U. u. составляет не менее 104 КОЕ/мл.
Отсутствие изменения окраски питательной среды уреаплазма – 50 "-" в трех пробирках с пробой К(+++), К(++) и К(+) по сравнению с окраской питательной среды уреаплазма – 50 в контрольной пробирке считается отрицательным результатом.
Примечание. Помутнение питательной среды уреаплазма – 50 (при изменении или без изменения окраски) в пробирках с исследуемым материалом при качественном и полуколичественном анализах свидетельствует о росте посторонней микрофлоры. Результаты исследований таких проб учету не подлежат и требуют повторного проведения анализа или дополнительного посева образца на плотную питательную среду "уреаплазма П-120" для морфологической идентификации колоний U. u.
Главная :: Каталог "Селективные среды, добавки и тест-системы для выделения, идентификации и определения антибиотикочувствительности микроорганизмов" :: Список инструкций