Хромогенные среды "Протеус ППМ" и "Klebsiella 5-ACK" отечественного производства

"Протеус ППМ"

Хромогенная среда "Протеус ППМ" разработана ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера для одноэтапного выделения и прямой идентификации группы бактерий родов Proteus, Providencia, Morganella (Сиволодский Е.П., 1986, 1992). Она основана на выявлении специфического для указанных бактерий фермента триптофандезаминазы, под действием которого колонии бактерий и окружающие их зоны среды окрашиваются продуктами расщепления L-триптофана в темно-коричневый цвет. "Роение" протея, а также рост грамположительной микрофлоры и некоторых видов грамположительных бактерий подавляется сульфанолом, входящим в состав препарата.

Препарат обладает высокой аналитической чувствительностью для протеев, провиденций, морганелл (2 - 6 КОЕ), имеет 100 % специфичность для клинических штаммов и высокую диагностическую чувствительность (95 %). Среда пригодна для клинической и санитарной микробиологии. Производится отделом новых технологий ФБУН НИИ им. Пастера (г. Санкт-Петербург).

Инструкция к "Протеус ППМ", покупка препарата

"Klebsiella 5-ACK"

К средам родовой идентификации относится разработанная нами первая отечественная хромогенная среда "Klebsiella 5-ACK" для одноэтапного выделения и окончательной идентификации бактерий рода Klebsiella (Сиволодский Е.П., 1985, 1988). Состав (г/л): сухой питательный агар из рыбного гидролизата 32 - 35; L-арабиноза 8 - 12; 5-аминосалициловая кислота (5-АСК) 4,5 - 5,5; бромтимоловый синий 0,06 - 0,08; дистиллированная вода 1 литр; 1N раствор NаОН до установления рН 6,8 - 7,2. Приготовление среды: в стерильную колбу, содержащую 200 мл расплавленного стерильного питательного агара, вносят 1 г 5-АСК, 2 г L-арабинозы; 0,8 мл 1,6 % спиртового раствора бромтимолового синего, перемешивают, добавляют 1N раствор NаОН (около 6 мл) до появления зеленой окраски среды (рН 6,8 - 7,2); разливают среду в стерильные чашки Петри.

Хромогенная среда прозрачная, зеленого цвета, пригодна к использованию в течение 5 суток хранения при 4 °С. Порядок использования: исследуемый материал (отделяемое ран, моча и др.) засевают петлей на поверхность среды (можно на ¼ часть чашки), инкубируют посевы при 35 - 37 °С в течение 20 - 24 ч, после чего окончательно идентифицируют бактерии рода Klebsiella по наличию зон черно-коричневой окраски среды вокруг выросших колоний или газона бактерий.

Препарат создан на основе обнаруженной нами уникальной хромогенной реакции клебсиелл с 5-аминосалициловой кислотой (5-АСК). Установленный нами биохимический механизм хромогенной реакции (Сиволодский Е.П. и соавторы, 1994) состоит в следующем: на первом этапе реакции в аэробных или анаэробных условиях обнаруженный нами уникальный фермент клебсиелл 5-аминосалицилат-декарбоксилаза отщепляет карбоксильный радикал от 5-АСК, образуя промежуточный бесцветный продукт пара-аминофенол, который на втором этапе реакции, протекающем только в аэробных условиях уже без участия бактерий, окисляется кислородом воздуха и полимеризуется в крупномолекулярный полимер темно-коричневого цвета. Хромогенную реакцию с 5-АСК дают все виды клебсиелл: K.pneumoniae (subsp. pneumoniae, subsp. ozanae, subsp. rhinoscleromatis), K.oxytoca, K.mobilis (Enterobacter aerogenes). Наличие этой реакции у K.mobilis подтверждает ее принадлежность к роду Klebsiella.

Не дают хромогенной реакции с 5-АСК бактерии нового рода Raoultella (R.planticola, R.terrigena, R.ornitinolytica), которые ранее относили к роду Klebsiella, что подтверждает уникальную специфичность этой реакции для клебсиелл. Не обладают этим ферментом все изученные нами грамотрицательные бактерии (более 40 родов). 5-АСК подавляет рост грамположительных бактерий на среде. Аналитическая ростовая чувствительность "Klebsiella 5-АСК" для видов K.pneumoniae subsp. pneumoniae, K.oxytoca, K.mobilis высокая (2 - 8 КОЕ), поэтому возможно использование ее в качестве среды первичного посева для выделения и идентификации указанных клебсиелл.

Для подвидов K.pneumoniae subsp.ozaenae и subsp. rhinoscleromatis ростовая чувствительность низкая 1 х 105 КОЕ. Поэтому для идентификации по хромогенной реакции указанных видов среда может использоваться только при посеве большой массы чистых агаровых культур (посев в виде "бляшки"). Диагностическая чувствительность среды - 95 %, диагностическая специфичность - 100 %. "Klebsiella 5-АСК" производится отделом новых технологий ФБУН НИИ им. Пастера (г. Санкт-Петербург).

Инструкция к "Klebsiella 5-ACK", покупка препарата

Назад

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий