Реакция антиген-антитело

В ИФА основной специфической реакцией является взаимодействие антигена с антителом.

Антитела или иммуноглобулины представляют собой белки, реагирующие с антигеном, который индуцировал их образование. Они состоят из 2 пар цепей, соединенных между собой десульфидными связями. Внутри каждой пары (легкая L и тяжелая H) цепи между собой идентичны. В зависимости от Н-цепей иммуноглобулины подразделяют на 5 классов. Легкие цепи делят на 2 типа, обозначаемые κ (капа) и λ (лямбда). Оба типа L-цепей входят в состав всех 5 классов иммуноглобулинов. Такие классы как IgG, IgD, IgE находятся в виде мономеров, IgM встречаются преимущественно в виде пентамера, а IgA - в виде моно-, ди- и тетрамеров. По результатам протеолиза такими ферментами, папайи и пепсин, в иммуноглобулинах выделяют Fab- b Fc-фрагменты. Специфической активностью по отношению к антигену обладают Fab-фрагменты, Fc-участок отвечает за основные эффекторные функции антител.

Антигенами называются вещества или структуры, способные вызывать иммунный ответ. Как правило, антигены имеют многочисленные детерминанты (эпитопы), к которым специфичны активные центры Fab- фрагментов образующихся антител. Набор детерминант определяет специфичность антигена, а их число его валентность. Для антигенной специфичности белков имеет значение их конформация. Изменение конфорации при денатурации белка приводит к потере некоторых детерминант. В основе взаимодействия перекрестно реагирующих антител с антигенами лежит структурное сходство с детерминантами специфического антигена.

Прочность связи Fab-фрагмента с антигенной детерминантой называется аффиностью и определяется величиной константы равновесия данной реакции. Для поликлональной сыворотки эта величина будет различной для тех молекул антител, которые являются продуктами разных В-клеток. В случае моноклональных антител такие различия исчезают. Так как антитела многовалентны (от 2 для IgG до 10 для IgM), то для характеристики прочности связывания антител с соответствующим антигеном вводят термин авидность. Она зависит от аффинности Fab-фрагментов и валентности антител.

Назад

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий