Методы с использованием гомобифункциональных реагентов

Небольшое количество доступных аминогрупп характерно не только для пероксидазы, но и для щелочной фосфатазы и других ферментов. Поэтому их взаимодействие с одной из реакционных группировок гомобифункционального реагента не приводит к преобладающей полимеризации за счет взаимодействия оставшейся реакционной группы сшивающего реагента с другими молекулами фермента. После добавления специфического реагента, содержащего амино-группы, образуется конъюгат сложного молекулярного состава [7]. Менее гетерогенный конъюгат и с более высоким выходом получают после предварительного удаления избытка гомобифункционального реагента с помощью гель хроматографии или диализа [9].

В качестве гомобифункциональных реагентов используют различные соединения, такие как глутаровый альдегид, 4,4/-дифтор-3,3/-динитро-дифенилсульфон, водорастворимые карбодиимиды, N,N-о-фенилендималемид, n-бензохинон, ди-N-гидроксисукцинимидиловый эфир янтарной кислоты, 2,4-диизоционаттолуол. Наиболее широко используется глутаровый альдегид для пероксидазы [7,9] и щелочной фосфатазы [24].

Назад

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий