Разработка полимерных микросфер для иммунофлуоресцентного анализа

В последние годы в диагностике активно разрабатываются мультиплексные методы анализа, позволяющие одновременно детектировать сразу несколько аналитов в одном образце небольшого объема. Одним из способов проведения таких анализов являются технологии, основанные на использовании суспензии полимерных микросфер диаметром 5-6 мкм, окрашенных одним или несколькими флуорофорами. Взятые в различных массовых соотношениях, эти красители позволяют получить матрицу из 100 и более микросфер, каждая из которых обладает уникальными спектральными характеристиками. На поверхности микросфер каждого типа фиксированы биолиганды, способные специфически взаимодействовать с исследуемыми аналитами. Сам анализ проводится с помощью проточных анализаторов (флуориметров).

К полимерным микросферам, используемым в мультиплексном суспензионном иммунофлуоресцентном анализе, предъявляют ряд требований: они должны иметь диаметр 5-6 мкм, что обусловлено технологическими параметрами проточных анализаторов, и узкое распределение по размерам; содержать на поверхности функциональные группы, способные ковалентно связываться с функциональными группами биолигандов, специфически взаимодействующих с исследуемыми аналитами; быть окрашенными одним или несколькими флуорофорами таким образом, чтобы образовывать набор из спектрально различимых частиц.

Выпуском полимерных суспензий для проточных анализаторов занимается ряд зарубежных фирм. Стоимость этих продуктов высока, в связи с чем представляется важным создать отечественные недорогие аналоги таких систем.

Методом затравочной полимеризации в присутствии смеси кремнийорганических поверхностно-активных веществ синтезированы карбоксилсодержащие полистирольные суспензии с узким распределением частиц по размерам и изучены их свойства: средний диаметр частиц (5,8 мкм), дзета-потенциал (–31,6 мВ) и количество функциональных групп на поверхности частиц. Разработанная методика окрашивания полимерных микросфер флуоресцентным красителем позволяет получить частицы с различной концентрацией красителя, распределенного равномерно по всему объему суспензии. Смеси этих полимерных микросфер, обладающих различной интенсивностью излучения, могут быть использованы для проведения мультиплексного иммунофлуоресцентного анализа. (См. статью: Волкова Е.В. с соавт. “Разработка полимерных микросфер для иммунофлуоресцентного анализа”).
"Биотехнология", 2012, № 4, с. 74 - 81.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий