Разработка латекс-агглютинационной тест-системы для выявления капсульного антигена F1 Yersinia pestis

Все чаще традиционные, а порой и казавшиеся недавно перспективными методы диагностики чумы оказываются недостаточными или принципиально неприемлемыми. В связи с этим возникает необходимость в конструировании новых экспресс–методов диагностики и индикации, направленных на сокращение времени проведения анализа, его упрощение при одновременном увеличении надежности и легкости интерпретации полученных результатов, а также высокой чувствительности и специфичности.

Известен способ постановки реакции пассивной гемагглютинации при индикации бактериальных агентов, который включает титрование исследуемого материала в буфере, внесение в эту же смесь на планшете эритроцитарных диагностикумов и наблюдение за формированием эритроцитами на днищах емкостей типичной картины по окончании реакции гемагглютинации. Недостатком этого способа является длительность реакции (2-4 часа), препятствующая его использованию для экспресс-индикации. Кроме того, эритроцитарные диагностикумы обладают собственной антигенностью, нестандартностью физико-химических свойств и нестабильностью при длительном хранении, что снижает точность выявления бактериальных патогенов.

В настоящее время использование гибридомной технологии позволяет получать стабильные препараты моноклональных антител (моно-АТ), которые эффективно используются в диагностических системах. Одним из вариантов применения моноАТ в качестве компонентов диагностических тест-систем служит реакция латекс-агглютинации, принцип которой состоит в иммунохимической реакции между антителами, связанными с полимерным носителем, который выполняет исключительно индикаторную функцию, и детектируемыми антигенами с образованием комплекса антиген-антитело. Появление таких комплексов в виде агглютинатов позволяет проводить учет результатов реакции невооруженным глазом.

Получены моноклональные антитела в капсульному антигену F1 Yersinia pestis, не взаимодействующие перекрестно с близкородственными иерсиниями и гетерологичными микроорганизмами. На их основе сконструирована тест-система с использованием реакции латекс-агглютинации для обнаружения F1-антигена. Предел обнаружения системы составляет 4 нг/мл. Проведены комиссионные испытания экспериментальных образцов полученного латексного диагностикума. (См. статью: Иващенко Т.А. с соавт. “Разработка латекс-агглютинационной тест-системы для выявления капсульного антигена F1 Yersinia pestis”).
"Биотехнология", 2012, № 6, с. 76 - 85.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий