Применение метода радиального гемолиза для выявления антител к вирусам гриппа птиц A(H5N1) и пандемическому вирусу A(H1N1)pdm09

Реакция радиального гемолиза (РРГ) – модификация метода локального гемолиза N. Jerne и A. Nordin была введена в практику вирусологии G. Schild и соавт. и широко применялась для изучения постгриппозного гуморального иммунитета и антигенных связей вирусов гриппа.

В первых работах по изучению РРГ основным звеном в индикаторной гемолитической системе служили эритроциты кур с химически прикрепленным к ним вирусом гриппа. Часть авторов использовала для РРГ традиционный для локального гемолиза вид эритроцитов – эритроциты барана, что в тот период не давало значительных преимуществ в эффективности метода.

В НИИ гриппа МЗ СССР в 80-90-е годы прошлого века эта реакция под названием “реакция пассивного радиального гемолиза” (РПРГ) была методически освоена вначале с куриными эритроцитами и далее широко использовалась как РРГ с введением в систему гемолиза эритроцитов барана для изучения поствакцинального иммунитета у привитых людей.

В связи с появлением новых потенциально опасных для человека вирусов гриппа птиц – A(H5N1), A(H7N7) и др. – эритроциты кур становятся менее чувствительным инструментом в обычных диагностических реакциях (реакция гемагглютинации – РГА, реакция торможения гемагглютинации – РТГА) вследствие иной специфичности новых штаммов к сиаловым рецепторам в сравнении с человеческими вирусами гриппа.

Одновременно возобновились попытки ввести в диагностику методы РГА и РТГА, но с применением в индикаторной системе эритроцитов лошади, и вернуть в практику метод РРГ.

Выполнены исследования, показавшие возможность успешного использования РРГ для анализа прививочного иммунитета у людей к новым штаммам вируса гриппа серотипа А – A(H5N1) и A(H5N2). РРГ дает четкие результаты при введении в гемолитическую систему эритроцитов лошади или барана вместо применявшихся ранее эритроцитов кур. Метод сочетает высокую чувствительность в сравнении с реакциями торможения гемагглютинации и микронейтрализации – коэффициент корреляции 0,84-0,85 и полное отсутствие влияния ингибиторов на результаты реакции.

При изучении иммунного ответа переболевших пандемическим вирусом A(H1N1)pdm09 РРГ показала не только преимущественное при пандемии выявление антител к вирусу-возбудителю (67%), но и избирательно повышенную чувствительность в зоне низкотитражных (1: 20) сывороток в РТГА, что важно при исследовании уровня антител на ранних сроках заболевания.

Таким образом, РРГ остается надежным инструментом оценки количественных и качественных показателей гуморального иммунитета у заболевших и привитых новыми штаммами вируса гриппа людей. (См. статью: Войцеховская Е.М. с соавт. “Применение метода радиального гемолиза для выявления антител к вирусам гриппа птиц A(H5N1) и пандемическому вирусу A(H1N1)pdm09”).
"Клин. лаб. диагностика", 2012, № 12, с. 28 - 31.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий