Оптимизация условий получения диагностических флюоресцирующих моноклональных иммуноглобулинов для идентификации холерных вибрионов О1- и О139-серогрупп

В настоящее время в соответствии с действующим МУК 4.2.2870-11 по лабораторной диагностике холеры регламентируется использование метода флюоресцирующих антител на всех этапах исследования клинического материала. Однако существующие ныне люминесцирующие сыворотки не отвечают в полной мере современным требованиям, так как имеют ряд недостатков: разнородность и гетерогенность популяций антител, низкие титры специфических иммуноглобулинов, наличие перекрестных реакций. Вопрос повышения чувствительности и специфичности диагностических препаратов может быть решен за счет использования моноклональных антител (МКА), как это было сделано за рубежом. В лаборатории гибридом РостНИПЧИ выведены стабильные гибридные клоны, продуцирующие видоспецифические МКА О1 и МКА О139. Их свойства детально охарактеризованы, и результаты исследований опубликованы. Гибридные клоны депонированы в специализированной коллекции клеточных культур позвоночных (Санкт-Петербург) под номерами РККК (П) 386 Д и РККК (П) 674 Д. На штаммы культивируемых гибридных клеток, продуцирующих МКА к О-антигену холерных вибрионов О1-серогруппы и к липополисахариду (ЛПС) холерных вибрионов О139-серогруппы, получены патенты. В России отсутствуют зарегистрированные моноклональные препараты для иммунодиагностики холеры, поэтому авторы считают актуальным разработку флюоресцирующих МКА и внедрение их в практическое здравоохранение.

Получены видоспецифические флюоресцирующие моноклональные иммуноглобулины для выявления холерных вибрионов О1- и О-139-серогрупп в реакции прямой иммунофлюоресценции. Установлено, что источником МКА для приготовления флюоресцирующих конъюгатов могут быть не только асцитические, но и культуральные жидкости. Подобраны оптимальные условия получения ФИТЦ-МКА, технология изготовления которых может быть воспроизведена в любое время ввиду наличия в криохранилище института гибридом-продуцентов МКА О1 и МКА О139. Результаты испытаний флюоресцирующих препаратов на гомологичных и гетерологичных штаммах показали их строгую специфичность и высокую чувствительность в отношении холерных вибрионов О1- и О139-серогрупп. Новые препараты способствуют существенному повышению эффективности диагностики V.cholerae О1 и О139. (См. статью: Кретенчук О.Ф. с соавт. “Оптимизация условий получения диагностических флюоресцирующих моноклональных иммуноглобулинов для идентификации холерных вибрионов О1- и О139-серогрупп”).
"Клин. лаб. диагностика", 2012, № 12, с. 32 - 34.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий