Использование моноклональных антител к прионам для их ретроспективного выявления на гистологических препаратах

Авторские моноклональные антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена (Григорьев В.Б. 2009, 2010; Покидышев А.Н., 2009), были переданы для изучения возможности ретроспективного выявления патологических прионов на гистологических препаратах мозга человека и животных, погибших или больных прионными болезнями. Были использованы гистологические препараты справочной коллекции по трансмиссивным губкообразным энцефалопатиям (Кармышева и др., 2003), созданной в лаборатории клещевого энцефалита и других вирусных энцефалитов Института полиомиелита и вирусных энцефалитов имени М.П.Чумакова. Были изучены препараты мозга пациента, страдавшего спорадической формой болезни Крейтцфельдта–Якоба, мозга овцы с натуральной болезнью скрепи и мозга белой мыши при экспериментальной инфекции агентом скрепи. Применен ретроспективный метод выявления антигенов, используемый в вирусологии (Кармышева В.Я., 1979). Выявление прионов проводили по обычной схеме. После постановки реакции с моноклональными антителами были выявлены места их связи с прионами по светло-коричневому или темно-коричневому окрашиванию части нейронов, глиоцитов, эндотелиоцитов, нервных волокон. В грушевидных нейронах (клетках Пуркинье) мозжечка погибшего пациента с болезнью Крейтцфельдта-Якоба прионы были видны в нейроплазме (особенно четко в области отхождения аксона), на нейролемме и в виде светло-коричневых ободков цитоплазмы вокруг ядер клеток-зерен. Эти участки находились в местах образования синапсов. В контрольных препаратах, обработанных по тому же плану, но без моноклональных антител, окрашивание отсутствовало. Результаты работы свидетельствуют о возможности использования МКА для выявления патологических прионов даже при ретроспективном изучении, что расширяет возможности диагностики прионов. (См. Материалы Х съезда Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов: Кармышева В.Я., Погодина В.В. “Использование моноклональных антител к прионам для их ретроспективного выявления на гистологических препаратах ”).
"Инфекция и иммунитет", 2012, № 1-2, с. 274.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий