Ускорение и повышение специфичности диагностики холеры

Источником моноклональных антител (МКА) служила культуральная жидкость (КЖ) гибридом-продуцентов, депонированных в специализированной коллекции клеточных культур позвоночных (Санкт-Петербург) под номерами РККК(II) 386Д и РККК(II) 674Д. Специфические иммуноглобулины (Ig) из КЖ концентрировали путем осаждения их насыщенным раствором сульфата аммония. Схема получения МКА-пероксидазных конъюгатов включала активацию пероксидазы (ПХ), конъюгацию активированной ПХ с Ig, удаление несвязавшихся белков, хранение и контроль. Сохранность активности конъюгатов обеспечивали с помощью БСА (10%) или глицерина (50%), причем использование последнего для этих целей предпочтительнее.

Испытание МКА-О1 и МКА-О139 пероксидазных конъюгатов на наборе штаммов холерных вибрионов О1 и О139 показало их строгую специфичность, так как они взаимодействовали только с соответствующими им серогруппами при отсутствии перекрестных реакций с представителями гетерологичных микроорганизмов. Постановка прямого дот-иммуноанализа осуществляется в течение 1,5 ч, чувствительность его находится в пределах 1056.

Применение диагностических моноклональных пероксидазных конъюгатов О1, О139 в лабораторной практике будет способствовать повышению специфичности серологического анализа на холеру и сокращению сроков его выполнения. (См. Алексеева Л. П. Использование моноклональных пероксидазных конъюгатов для идентификации холерных вибрионов серогрупп О1, О139 в реакции дот-иммуноанализа // Л. П. Алексеева, Г. А. Козлова, О. В. Маркина и др. / Клиническая лабораторная диагностика. - 2013. - № 3. - С. 26-29.).

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий