Диагностика туберкулеза

Раннее выявление изолятов микобактерий туберкулеза (МБТ), устойчивых к противотуберкулезным препаратам (ПТП), крайне необходимо для оптимизации схемы лечения и предотвращения распространения устойчивых штаммов.

В обзоре литературы рассматриваются данные о новом, быстром и недорогом методе детекции мутаций в генах МБТ, отвечающих за множественную лекарственную устойчивость (МЛУ).

Молекулярно-генетический метод HRM (high resolution melting curve analysis) основан на проведении амплификации фрагментов ДНК с последующим анализом их кривых плавления с высоким разрешением. Метод показал высокую чувствительность и специфичность. В отличие от других молекулярно-генетических методов определения резистентности МБТ HRM-анализ позволяет выявлять все мутации в интересующих фрагментах генов, различать ДНК мутантного и дикого типов в их смеси, не имеет контаминационной опасности.

HRM-анализ может стать основой для создания диагностических наборов с целью выявления туберкулеза с МЛУ (МЛУ-ТБ). Распространение множественной лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза (МЛУ МБТ) существенно угрожает усилиям здравоохранения по контролю за заболеваемостью туберкулезом. МЛУ МБТ - это устойчивость к изониазиду и рифампицину одновременно (независимо от наличия или отсутствия устойчивости к другим препаратам).

Определение устойчивости МБТ культуральными методами занимает от 5 нед. до 4 мес. на плотных и от 10 до 52 дней на жидких питательных средах с использованием автоматических анализаторов. В течение этого времени больной получает эмпирическое противотуберкулезное лечение без индивидуального учета профиля резистентности.

В настоящее время разработан ряд быстрых методов определения лекарственной чувствительности, основанных на анализе ДНК МБТ. Быстрое выявление случаев множественной лекарственной устойчивости туберкулеза (МЛУ-ТБ) необходимо для своевременного лечения пациентов и уменьшения распространенности устойчивых к противотуберкулезным препаратам (ПТП) штаммов.

Стандартные культуральные методы для определения МЛУ-ТБ - это метод абсолютных концентраций и метод пропорций, которые требуют много времени, громоздки и трудоемки. В настоящее время для быстрого детектирования изолятов, устойчивых к лекарственным препаратам, внедряются новые молекулярно-генетические методы, такие как ПЦР в реальном времени, гибридизация ДНК в формате чипов, секвенирование. (См. Лаврова О.И. HRM - новый молекулярный метод определения лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза / О.И.Лаврова, М.В. Фигероа Альварес, М.Г. Творогова // Клиническая лабораторная диагностика. – 2014. – N 7. - С. 62-64).

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий