Диагностика холеры

В настоящее время для выявления противохолерных антител у больных, переболевших, вибриононосителей и вакцинированных людей используется развернутая реакция агглютинации исследуемых сывороток крови человека с трехчасовой бульонной культурой Vibrio cholerae, выделенной в данном очаге, или с тестовыми штаммами холерных вибрионов сероваров Огава, Инаба и O139 серогруппы. Время анализа при этом составляет 18 ч. Длительное время анализа, субъективность учета результатов ставят актуальной задачу создания тест-систем нового поколения, обеспечивающих высокую производительность анализа, получение ответа в более короткие сроки, сокращение объема исследуемого образца.

В настоящее время существенное развитие получила технология анализа сложных биологических систем с помощью биологических микрочипов (биочипов). В биологических микрочипах, в отличие от традиционных серологических методов, реализуется возможность одновременного параллельного анализа исследуемого образца по многим параметрам, то есть проведение многопараметрического анализа на наличие антител различной специфичности. Это значительно увеличивает эффективность анализа, снижает требуемое количество исследуемого материала, позволяет миниатюризировать проведение исследований, повысить достоверность результатов и автоматизировать этапы проведения анализа.

Раздельное выявление антител различной специфичности важно при проведении эпидемиологического расследования случаев холеры. Определение антител к холерному токсину в сыворотке крови людей позволяет сделать заключение об эпидемической значимости штаммов холерных вибрионов, циркулирующих в очаге холеры.

Для сокращения времени обнаружения АТ авторами разработан биологический микрочип (биочип). Биочип представляет собой активированное предметное стекло с иммобилизованными корпускулярными и растворимыми антигенами возбудителя холеры (О-антигены, холерный токсин). В результате экспериментальной работы разработана схема биочипа, подобраны оптимальные условия сорбции и проведения иммунологического анализа на биочипе.

С помощью биочипа выявлены специфические АТ к антигенам возбудителя холеры в коммерческих, экспериментальных сыворотках животных и сыворотках крови от больных людей. Время постановки анализа составило 2 - 3 ч. Результаты подтверждены бактериологическими и серологическими методами.

(См. Уткин Д.В. Разработка биочипа для выявления противохолерных антител в сыворотке крови человека / Н.А Осина., А.Н. Спицын, М.Н. Киреев, О.В.Громова, Т.Л. Захарова, Е.В. Найденова, В.Е. Куклев // Клиническая лабораторная диагностика. – 2015. – N 2. - С. 50 - 53; Патент РФ № 2528099).

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий