Разработка и оценка нового теста для верификации исследований на маркеры ВИЧ-инфекции

Основным методом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции в России является обнаружение суммарного спектра антител к антигенам ВИЧ либо одновременное выявление антител и вирусного антигена р24 с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). Точный момент времени, когда могут быть выявлены серологические маркеры ВИЧ-инфекции, зависит от нескольких факторов, включая чувствительность теста, индивидуальный ответ организма.

При использовании высокочувствительных тест-систем (3-10 пг/мл) антиген может выявляться уже через 2 недели после заражения и детектироваться в течение 3-5 месяцев. Антитела к вирусу могут выявляться через 3-4 недели после заражения. В терминальной фазе СПИДа количество антител может значительно снижаться вплоть до полного их исчезновения, а концентрация р24 вновь возрастает.

Для верификации результатов ИФА в России используют метод иммунного блоттинга (ИБ), который позволяет выявлять антитела к отдельным белкам ВИЧ. Существуют ИБ, основанные на применении инактивированных белков вируса или на рекомбинантных и синтетических полипептидах, аналогах антигенов ВИЧ.

Одной из основных проблем лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции является интерпретация результатов анализа образцов, серопозитивных в ИФА, и отрицательных или «неопределенных» в ИБ. Число таких образцов может достигать 20-30%. На сегодняшний день в мире нет единых критериев для интерпретации результатов ИБ. Особенно сложной для интерпретации является стадия сероконверсии, когда определяется неполный спектр антител и образец считается по одним критериям положительным, по другим неопределенным. Причинами «неопределенных» или отрицательных результатов могут быть: 1) ранняя и поздняя стадии ВИЧ-инфекции, когда уровень антител низкий, в ИБ выявляются антитела только класса G, а подтверждение наличия антигена р24 не предусмотрено; 2) кросс-реактивность между ВИЧ-1 и ВИЧ-2; 3) кросс-реактивность с другими антигенами, не связанными с ВИЧ, аутоиммунные заболевания, другие причины.

При получении неопределенного результата в ИБ пациента ставят на диспансерный учет и обследуют на наличие антител в динамике. Это удлиняет общее время и стоимость тестирования. Таким образом, сокращение числа неопределенных результатов – одна из основных проблем лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции.

С целью совершенствования алгоритма подтверждения ВИЧ-инфекции в ООО НПО «Диагностические системы» была разработана новая иммуноферментная тест-система планшетного формата «ДС-ИФА-ВИЧ-АТ/АГ-СПЕКТР», предназначенная для раздельного выявления антител к отдельным белкам ВИЧ 1-го и 2-го типов и антигена р24 в анализируемом образце.

Полученные данные показывают высокую диагностическую эффективность тест-системы «ДС-ИФА-ВИЧ-АТ/АГ-СПЕКТР». Введение в тест-систему маркера ранней стадии инфекции – антигена р24 с высокой чувствительностью и выявление антител всех классов позволило значительно сократить количество неопределенных результатов, полученных при использовании иммунного блоттинга. Приведенные данные показывают, что разработанная тест-система «ДС-ИФА-ВИЧ-АТ/АГ-СПЕКТР» является эффективным инструментом для подтверждения положительных результатов скрининга и может быть использована на заключительном этапе лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. (См. статью: Баранова Е.Н. с соавт. “Разработка и оценка нового теста для верификации исследований на маркеры ВИЧ-инфекции”).

"Клин. лаб. диагностика", 2008, № 3, с. 40 - 42.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий