Специфические иммуноглобулины класса М в диагностике краснухи

Краснуха является одной из причин внутриутробного инфицирования плода, проявляющегося серьезными тератогенными последствиями. Данное обстоятельство обусловливает необходимость разработки и совершенствования современных методов ранней диагностики заболевания. Одним из маркеров острой приобретенной и врожденной краснушной инфекции являются специфические иммуноглобулины класса М (IgM), появляющиеся на ранних стадиях заболевания.

Целью работы являлось конструирование иммуноферментной тест-системы для выявления специфических IgM к вирусу краснухи в сыворотке крови человека.

Конструирование тест-системы проводили на основе непрямого варианта твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). Иммуносорбент готовили на основе антигена вируса, выращенного в культуре клеток Vero и афинноочищенного с использованием моноклональных антител (МА) к вирусспецифическому гликопротеину Е1. Выявление комплекса антиген-антитело проводили пероксидазным конъюгатом на основе МА к IgM человека. В качестве энзимсубстрата использовали тетраметилбензидин.

Разработка тест-системы включала исследования по оптимизации условий приготовления иммуносорбента, методов его стабилизации, проведения ИФА и отработки методик устранения влияния неспецифических факторов (ревматоидный фактор).

Для определения чувствительности и специфичности тест-системы использовали охарактеризованную панель сывороток крови человека, состоящую из образцов, содержащих вирусспецифические IgM к вирусу краснухи от больных с подтвержденной краснухой, а также образцов с вирусспецифическими IgG и не содержащих антител к вирусу краснухи. Отдельную панель составили потенциально интерферирующие сыворотки крови, не содержащие IgM к вирусу краснухи, но содержащие ревматоидный фактор, иммуноглобулины класса М к вирусам кори, цитомегалии и герпеса простого. В качестве тест-систем сравнения использовали коммерческие иммуноферментные тест-системы для выявления IgM к вирусу краснухи «Вектор-Бест» (Россия), «Human» и «Dade Behring» (Германия).

На основе проведенных исследований сконструирована иммуноферментная тест-система для выявления IgM к вирусу краснухи в сыворотках крови людей, обладающая чувствительностью и специфичностью, не уступающей коммерческим аналогам. (См. тезисы: Степанов А.В. с соавт. “Специфические иммуноглобулины класса М в диагностике краснухи”).

Материалы 9-го съезда эпидемиологов. М., 2007, т. 2, с. 169 - 170.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий