Идентификация микобактерий методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Существенное значение для постановки диагноза (туберкулез, микобактериоз) и назначения своевременного адекватного лечения имеет быстрая и точная идентификация выделенной из клинического образца культуры микобактерий. В настоящее время существует ряд способов идентификации микобактерий, и возможности в этой области постоянно увеличиваются. Методы выделения микобактерий на плотных (в первую очередь Левенштейна-Йенсена) и жидких (Middlebrook 7H9) средах с последующей культуральной и биохимической идентификацией сохраняют свое значение, но все большое место занимают молекулярно-генетические методы и высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), так как они значительно сокращают время получения результатов.

Метод ВЭЖХ для идентификации и классификации микобактерий был предложен в 1985 г., и уже в конце 80-х годов было сделано заключение о важности его широкого применения с этой целью на практике. В 1989 г. ВЭЖХ включена в обязательный набор тестов микобактериологической референс-лаборатории (CDC, США). В 1990 г. ее рекомендовали для использования в микобактериологических референс-лабораториях в качестве стандартного метода для идентификации видов, входящих в род Mycobacterium.

В нашей стране исследования по идентификации микобактерий с помощью ВЭЖХ пока не проводились, а анализ культур, выделенных, главным образом, на плотных питательных средах, стандартными биохимическими методами, дает результаты в среднем через 2-3 месяца. Цель работы – сравнение результатов идентификации микобактерий бактериологическими методами и методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Были исследованы 280 культур микобактерий, выделенных из респираторных образцов и идентифицированных бактериологическими методами и ВЭЖХ. Установлено, что при использовании ВЭЖХ имела место высокая степень совпадения с результатами микробиологических методов идентификации микобактерий: при определении M.tuberculosis complex – 97,0%, медленнорастущих нетуберкулезных микобактерий – 95,3%, быстрорастущих нетуберкулезных микобактерий – 96,2% (в целом 96,1%). При этом результаты идентификации микобактерий методом ВЭЖХ удается получить в значительно более короткие сроки (в течение 24 часов). Метод ВЭЖХ может быть рекомендован для идентификации микобактерий в бактериологических референс-лабораториях. (См. статью: Макарова М.В. с соавт. “Идентификация микобактерий методом высокоэффективной жидкостной хроматографии”).

"Журн. микробиол.", 2009, № 3, с. 64 - 66.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий