Диагностическая эффективность фосфоресцентных иммуночипов при серодиагностике клещевого энцефалита

В последние годы иммуночипы начинают активно использовать в лабораторной практике для серодиагностики инфекций. В отличие от "объемных" методов иммунохимического анализа, таких как твердофазный иммуноферментный метод (ТИФА), проведение реакции в формате иммуночипа включает взаимодействие исследуемой сыворотки крови с набором диагностически значимых иммунодоминантных и контрольных антигенов, "напечатанных" в виде микрозон ("микроэрреев", или микропятен) на поверхности стеклянных слайдов, микросфер или на дне лунок микропланшетов. Наряду с повышением производительности и снижением стоимости такой подход обеспечивает качественно новые возможности для оценки воспроизводимости и контроля качества измерений и создает условия для проведения мультикомпонентного анализа.

Цель работы – оценить чувствительность и специфичность фосфоресцентных иммуночипов, разработанных на основе микропланшетного фосфоресцентного анализа (ФОСФАН) для определения IgM и IgG к вирусу клещевого энцефалита (КЭ) в сыворотках крови пациентов, и сравнить показатели ФОСФАН и методов лантанидной иммунофлюоресценции (ЛИФА) и ТИФА.

Исследована 261 сыворотка крови, в том числе 155 проб от 74 пациентов с клиническим диагнозом КЭ, подтвержденным серологически выявлением IgM к вирусу КЭ. Сыворотки собраны в 2003 г. в Пермской области от людей, заболевших КЭ, а также от клинически здоровых доноров крови. Фосфоресцентный иммуночип представлял собой 96-луночный микропланшет, на дне лунок которого были сформированы 4 активные микрозоны, позволяющие улавливать специфические IgM или IgG к вирусу КЭ. Иммунореакцию проявляли конъюгатом стрептавидина с Pt копропорфирином. Интенсивность фосфоресценции измеряли при сканировании дна предварительно высушенной микролунки прибором-сканером ИФИ-02.

При выявлении в пробах IgM и IgG к вирусу КЭ продемонстрирована сопоставимая чувствительность и специфичность методов ФОСФАН, ЛИФА и ТИФА. При анализе сывороток с низким титром специфических IgM методы ФОСФАН и ЛИФА были более чувствительными. ФОСФАН можно использовать для ранней серологической диагностики острого КЭ, а также для оценки уровня антител при контроле эффективности лечения длительно болеющих пациентов и уровня протективного иммунитета у вакцинированных. (См. статью: Помелова В.Г. с соавт. "Диагностическая эффективность фосфоресцентных иммуночипов при серодиагностике клещевого энцефалита").

"Журн. микробиол.", 2009 № 3, с. 71 - 75.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий