Разработка тест-системы на основе желточных
иммуноглобулинов иммунизированных перепелов для
индикации HBsAg

В. Российской Федерации основной метод этиологической лабораторной диагностики вирусного гепатита В (ВГВ) – серологический. В настоящее время "золотым" стандартом в диагностике ВГВ, помимо клинико-биохимических признаков, является выявление поверхностного антигена вируса гепатита В - HBsAg.

За последние 5 - 10 лет значительно возросла чувствительность и специфичность существующих тест-систем. В качестве диагностического средства используются моноклональные антитела, полученные с помощью гибридомной технологии, и сывороточные поликлональные антитела, полученные от животных-доноров. Производство диагностических антител к НВsAg является длительным и дорогостоящим. Стоимость 1 г моноклональных антител к НВsAg (производства ЗАО "Вектор-Бест" (Россия) составляет около 1500 рублей. Использование птиц, в частности перепелов, в качестве продуцентов диагностических иммуноглобулинов экономически более эффективно, чем использование антител, полученных методом гибридомной технологии, и от различных видов животных, так как финансовые затраты на единицу массы получаемых специфических иммуноглобулинов значительно ниже.

Целью исследования является разработка тест-системы на основе желточных иммуноглобулинов иммунизированных перепелов (Coturnix coturnix japonica) для индикации НВsAg.

По своим иммунофизиологическим показателям и возможности поддержания статуса SPF применение в качестве биологической модели перепелов вида Coturnix coturnix japonica для получения диагностических желточных иммуноглобулинов является обоснованным. Иммунизация перепелов НВsAg, сорбированным на гидроокиси алюминия и введенным в обратную эмульсию "вода-масло", приводит к статистически значимому (р < 0,001) снижению морфометрических показателей перепелиных яиц. В то же время не отмечено влияния препаратов, используемых для иммунизации, на динамику яйцекладки перепелов, Основным лимитирующим фактором внешней среды, влияющим на динамику яйцекладки перепелов, а соответственно и количество получаемых диагностических иммуноглобулинов, является долгота дня.

Использование для иммунизации перепелов НВsAg, сорбированного на гидроокиси алюминия и введенного в обратную эмульсию "вода-масло", позволяет получать более высокие титры специфических антител по сравнению с иммунизацией перепелов НВsAg , сорбированным на гидроокиси алюминия. Повышение уровня антител к НВsAg в сыворотке крови иммунизированных перепелов является критерием повышения уровня специфических антител в желтках яиц (р < 0,001).

Применение специфических желточных антител в опытном образце диагностической тест-системы для индикации НВsAg позволяет получать результаты, сопоставимые с результатами тест-систем производства ЗАО "Вектор-Бест" (Россия) и ЗАО "ЭКОлаб" (Россия). Разработанная схема получения и выделения специфических диагностических иммуноглобулинов из желтков яиц иммунизированных перепелов для индикации НВsAg является эффективной и позволяет получать их в необходимых объемах. (См. диссертацию "Разработка тест-системы на основе желточных иммуноглобулинов иммунизированных перепелов для индикации HBsAg").

Сокурова А.М. Автореф. дис. канд. биол. наук. СПб, 2009.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий