Ускоренное определение чувствительности Mycobacterium tuberculosis к основным противотуберкулезным препаратам в системе "Bactec MGIT 960 " и на биочипах "ТБ-Биочип "

Длительность роста Mycobacterium tuberculosis (МБТ) на плотных питательных средах является основной причиной того, что клиницист-фтизиатр получает сведения о лекарственной чувствительности возбудителя туберкулеза практически к моменту завершения интенсивной фазы лечения, назначая больным туберкулезом с самого начала эмпирическое лечение без достоверной информации о наличии лекарственной чувствительности МБТ. В связи с этим внедрение в микробиологическую диагностику туберкулеза быстрых специфических и высокочувствительных методов определения лекарственной чувствительности возбудителя туберкулеза к противотуберкулезным препаратам является крайне актуальным.

Разработанная специалистами фирмы "Becton Dickinson" автоматизированная система "Bactec MGIT 960" максимально стандартизировала методику, так как реактивы для пробоподготовки и компоненты питательных сред производят в заводских условиях на контролируемом производстве, и позволила автоматически регистрировать рост в каждой из 960 пробирок. При значительном количестве возбудителя туберкулеза в мокроте (положительной бактериоскопии) получение результатов теста на лекарственную чувствительность возможно в течение 2 - 3 недель. Однако рост на жидкой питательной среде неспецифичен, поэтому возможен рост нетуберкулезных микобактерий, грибов и других микроорганизмов, устойчивых к действию щелочи, антибиотиков и противогрибковых препаратов. Методика подтверждения специфичности роста на жидких питательных средах предусматривает посев выросшей в пробирке культуры на кровяной агар для идентификации микробной контаминации и окраску мазков по Цилю-Нильсену для обнаружения кислотоустойчивых палочек и корд-фактора.

Вместе с тем коррекция указанных недостатков метода с включением в алгоритм исследования современных молекулярно-генетических методов позволяет не только не потерять в скорости получения конечного результата, но и существенно снизить затраты на выявление возбудителя туберкулеза. Биологические микрочипы "ТБ-Биочип" (биочипы) позволяют определить в биологическом материале микобактерии туберкулезного комплекса (детекция специфического маркера IS6110), устойчивость к рифампицину (выявление мутаций в rpoB гене), изониазиду (выявление мутаций в katG, inhA, ahpC генах).

Цель исследования – ускоренное определение чувствительности возбудителя туберкулеза на "Bactec MGIT 960" и на биочипах "ТБ-Биочип" к основным противотуберкулезным препаратам и выявление частоты совпадения результатов, полученных данными методами.

В целях оценки методов ускоренного определения чувствительности микобактерии туберкулеза на "Bactec MGIT 960" и на биочипах "ТВ-Биочип" к основным противотуберкулезным препаратам было проведено исследование 162 культур МБТ, выявленных из мокроты и бронхоальвеолярного смыва от 193 больных с различными формами туберкулеза легких. Результаты двух методов совпали в 95,1% случаев для изониазада и 96,9% - для рифампицина. Оптимальным подходом при определении лекарственной чувствительности является использование сочетания методов "Bactec MGIT 960" и "ТБ-Биочип". (См. статью: Барило В.Н. с соавт. "Ускоренное определение чувствительности Mycobacterium tuberculosis к основным противотуберкулезным препаратам в системе "Bactec MGIT 960" и на биочипах "ТБ-Биочип").

"Туберкулез и болезни легких", 2009, № 11, с. 56 - 60.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий