Иммуночип для дифференциации IgG к вирусам клещевого энцефалита и лихорадки Западного Нила

Перспективным подходом к дифференциальной серодиагностике природно-очаговых заболеваний, вызываемых флавивирусами, может оказаться использование иммуночипов. В отличие от обычных иммунохимических методов, таких как ИФА, проведение реакции в формате иммуночипа включает взаимодействие обследуемой сыворотки с набором диагностически значимых иммунодоминантных и контрольных антигенов, "напечатанных" в виде микрозон ("микроэрреев", или микропятен) на поверхности стеклянных слайдов, микросфер или на дне лунок микропланшетов, что позволяет охарактеризовать спектр содержащихся в сыворотке специфических антител.

Ранее авторы статьи сообщали о разработке на основе микропланшетной технологии фосфоресцентного анализа (ФОСФАН) иммуночипов для выявления IgM и IgG к вирусу клещевого энцефалита (КЭ), антигенов и кДНК вируса КЭ, специфических антигенов других вирусов и бактерий. Цель работы – продемонстрировать возможность создания на основе метода ФОСФАН теста для одновременного выявления и дифференциации специфических IgG к вирусам КЭ и лихорадки Западного Нила (ЛЗН).

В работе использовали 26 сывороток больных ЛЗН, 25 – КЭ и 66 – клинически здоровых доноров крови. Иммуноанализ проводили в лунках планшета, на дне которых были "напечатаны" активные микрозоны в виде комплекса вирусспецифических антигенов с иммобилизованными моноклональными антителами; в каждую лунку был включен внутренний контроль специфичности. Видовую принадлежность антител определяли на основе не менее чем 2-кратного превышения значения коэффициента позитивности (P/N) обследуемой пробы с гомологичным антигеном над гетерологичным.

ФОСФАН обеспечивает одновременное выявление в сыворотке крови человека IgG к двум родственным флавивирусам: ЛЗН и КЭ. Использование критерия P\N, оцениваемого с гомологичным и гетерологичным антигеном, позволило правильно установить видовую принадлежность антител при анализе примерно 90% сывороток больных ЛЗН и КЭ.

ФОСФАН позволяет выявлять и дифференцировать IgG к вирусам ЛЗН и КЭ при исследовании одной пробы сыворотки в одной лунке планшета без снижения чувствительности по сравнению с ИФА при раздельном тестировании проб. Это обеспечивает экономию биоматериала и является преимуществом по сравнению с ИФА. (См. статью: Помелова В.Г. с соавт. "Иммуночип для дифференциации IgG к вирусам клещевого энцефалита и лихорадки Западного Нила").

"Журн. микробиол.", 2010, № 1, с. 62 - 67.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий