Стабилизация пероксидазных конъюгатов, используемых в иммуноферментных тест-системах для выявления антигенов вирусов Эбола и Марбург

Важным качеством иммуноферментных наборов реагентов является высокая стабильность их свойств в течение длительного срока хранения. Пероксидазу хрена (ПХ) широко используют в иммуноферментном анализе, однако данный фермент является чувствительным к ряду факторов, что приводит к потере его активности в процессе хранения. Таким образом, при конструировании иммуноферментных наборов реагентов необходимо применять стабилизирующие растворы для конъюгатов с ПХ. Установлено, что в значительной степени можно увеличить стабильность серий конъюгатов с помощью "белковой" стабилизирующей среды в присутствии 0,22% хлорида кальция, 0,02% бычьего сывороточного альбумина (БСА) и 0,02% твина-20. Показана возможность использования в составе данного раствора 3,3’ 5,5’-тетраметилбензидина (ТМБ) в концентрации 0,001%, который также обладает защитным действием на пероксидазу. В результате оценки различных консервантов установлено, что "ProClin 300" существенно эффективнее предотвращает развитие микрофлоры и не влияет на активность фермента.

Целью работы являлось конструирование эффективной стабилизирующей среды для конъюгатов противовирусных иммуноглобулинов с ПХ.

Разработана стабилизирующая среда для конъюгатов иммуноглобулинов с ПХ, представляющая собой буферный раствор на основе трис-НСl (рН 7,2), содержащий 0,85% хлорида натрия, 0,22% хлористого кальция, 0,001% ТМБ, а также по 0,02% БСА, твина-20 и "ProClin 300". Срок годности серий конъюгатов, приготовленных на основе данного раствора, при температуре хранения от 2 до 8 °С составляет 10 месяцев, при этом снижение активности препаратов не превышает 10% от исходного значения.

Полученный стабилизирующий раствор для пероксидазных конъюгатов использовали в процессе изготовления компонентов иммуноферментных наборов реагентов для выявления антигенов вирусов Эбола (ФСП 42-102-75-70) и Марбург (ФСП 42-102-75-72), что позволило обеспечить стабильность и высокую воспроизводимость диагностических препаратов. (См. статью: Пирожков А.П. с соавт. "Стабилизация пероксидазных конъюгатов, используемых в иммуноферментных тест-системах для выявления антигенов вирусов Эбола и Марбург").

"Вопр. вирусол.", 2010, № 1, с. 45 - 48.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий