Молекулярно-генетические технологии в этиологической диагностике диссеминированного туберкулеза легких

Разнообразие клинико-рентгенологических проявлений и недостаточная эффективность традиционного микробиологического метода лабораторной диагностики обусловливают трудности в верификации диагноза. Эффективность лечения больного диссеминированным туберкулезом легких (ДТЛ) зависит от своевременного назначения курса химиотерапии с учетом результатов определения чувствительности возбудителя к противотуберкулезным препаратам микробиологическим методом. Поскольку культивирование микобактерий требует не менее 4 недель, индивидуализировать и вовремя скорректировать схему лечения с учетом спектра лекарственной устойчивости возбудителя не представляется возможным, что крайне неблагоприятно в клиническом и эпидемиологическом плане. Наибольшие сложности представляет лечение больных, выделяющих микобактерии туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ), характеризуемой одновременным наличием резистентности к наиболее эффективным противотуберкулезным препаратам первого ряда – рифампицину и изониазиду. Это диктует необходимость внедрения в лабораторную практику современных технологий быстрой идентификации возбудителя и определения мутаций в генах, ассоциированных с лекарственной устойчивостью микобактерий туберкулеза (МБТ) к рифампицину и изониазиду, непосредственно в клиническом материале.

Цель исследования – оптимизация этиологической диагностики ДТЛ и определения лекарственной чувствительности возбудителя на основе молекулярно-генетических методов.

Изучены образцы респираторного материала больных ДТЛ с использованием метода ПЦР в режиме реального времени и тест-системы "ТБ-БИОЧИП" ИМБ РАН. Методы сполиготипирования и обратной гибридизации применяли для идентификации, генотипирования и экспресс-детекции лекарственной устойчивости к рифампицину МБТ в окрашенных препаратах для бактериоскопии из мокроты.

У 76 (41,5%) из 183 больных с рентгенологическими признаками ДТЛ в образцах респираторного материала обнаружена ДНК микобактерий туберкулезного комплекса (специфичность 87,7%); мутации в гене rpoB и в генах katG, inhA и области ahpC-oxyR, ассоциированные с устойчивостью к рифампицину и изониазиду, выявлены у 67% и 79,5% больных ДТЛ соответственно. В 48,8% образцов мокроты из препаратов для микроскопии идентифицирована ДНК МБТ эпидемиологически значимого генотипа Beijing, ассоциированного с МЛУ возбудителя туберкулеза в России.

Молекулярно-генетические методы позволяют использовать не только свежий респираторный, но и архивный материал для быстрой верификации дагноза ДТЛ при олигобациллярных формах туберкулеза, но и своевременно назначить и корректировать схему лечения пациента с учетом спектра индивидуальной чувствительности возбудителя к противотуберкулезным препаратам (См. статью: Журавлев В.Ю. с соавт. "Молекулярно-генетические технологии в этиологической диагностике диссеминированного туберкулеза легких").

"Журн. микробиол.", 2010, № 3, с. 77 - 81.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий