Сравнительный анализ определения лекарственно-устойчивых штаммов M.tuberculosis бактериологическим методом абсолютных концентраций и методом биологических микрочипов

В Кыргызской Республике для определения лекарственной устойчивости M.tuberculosis (МБТ) к противотуберкулезным препаратам первого ряда (рифампицину (Rif), изонизиду (INH), стрептомицину и этамбутолу) традиционно применяют бактериологические методы, в частности метод абсолютных концентраций. С 2005 г. в Кыргызстане для выявления устойчивости МБТ к Rif и INH, наряду с бактериологическими методами, начали использовать биологические микрочипы "ТБ-Биочип" (ООО "ТБ-Биочип", г. Москва).

Цель исследования – оценить диагностическую ценность метода биочип-анализа в определении лекарственно-устойчивых/чувствительных штаммов МБТ к рифампицину и изониазиду.

Для проведения микробиологических и молекулярно-генетических исследований мокроту собирали в стерильные пластиковые пробирки емкостью 50 мл с герметически завинчивающимися крышками. После деконтаминации мокроты и концентрирования МБТ отмытый осадок МБТ делили на 2 части: одну часть использовали для посева на плотную питательную среду Левенштайна-Йенсена с последующим выявлением чувствительности МБТ к Rif, INH, стрептомицину и этамбутолу бактериологическим методом абсолютных концентраций, вторую – для выделения ДНК МБТ и определения мутаций в генах rpoB (устойчивость к Rif), katG, inhA и ahpC (устойчивость к INH) методом биочипов.

При предложении любого нового метода тестирования лекарственной устойчивости МБТ его результаты должны совпадать с результатами, полученными традиционным методом, и должны быть получены значительно быстрее. Данные нашего исследования показали, что тест-система "ТВ-Биочип" удовлетворяет этим требованиям. Чувствительность и специфичность биочип-метода при выявлении МБТ с множественной лекарственной устойчивостью составили 90 и 97%; при выявлении INН-устойчивых/чувствительных штаммов МБТ - 93 и 93%; для Rif-устойчивых/ чувствительных штаммов - 88 и 96%. Таким образом, метод биочип-анализа по своей чувствительности и специфичности не уступает стандартному бактериологическому методу исследования.

В то же время биочип-метод обладает рядом преимуществ: экономит время лабораторной диагностики. Результаты лекарственной устойчивости МБТ к Rif и INН пациенты и клиницисты получают в течение двух дней, что является одним из главных условий правильного лечения больного туберкулёзом. Экспресс-выявление устойчивых к Rif и INН штаммов МБТ позволяет своевременно изолировать больных, выделяющих лекарственно-устойчивые штаммы МБТ и назначить им адекватное лечение, что может быть единственным практическим способом ограничить трансмиссию штаммов М.tuberculosis с множественной лекарственной устойчивостью. ТВ-биочипы компактны и просты в использовании, не требуют выращивания чистой культуры МБТ и применения радиоактивных элементов. Эти преимущества оправдывают внедрение тест-системы "ТВ-Биочип" для определения лекарст-венной чувствительности М.tuberculosis к Rif и INН в странах с высоким уровнем заболеваемости туберкулёзом. (См. статью: Исакова Ж.Т. с соавт. "Сравнительный анализ определения лекарственно-устойчивых штаммов M.tuberculosis бактериологическим методом абсолютных концентраций и методом биологических микрочипов").

"Туберкулез и болезни легких", 2011, № 3, с. 57 - 59.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий