Разработка и испытания молекулярно-биологической тест-системы для выявления ДНК возбудителя сибирской язвы методом полимеразной цепной реакции в реальном времени

Высокая устойчивость сибиреязвенных спор к воздействию неблагоприятных факторов внешней среды способствует длительному сохранению возбудителя и созданию стойких почвенных очагов, представляющих постоянную опасность для человека и животных. В настоящее время в различных регионах нашей страны официально зарегистрировано более 35 тысяч неблагополучных по сибирской язве пунктов, на территории которых периодически наблюдаются случаи заболевания людей и животных. В целом эпидемическая обстановка в России по данному заболеванию оценивается как напряженная и не имеющая тенденции к стабилизации. Кроме того, Bacillus anthracis возглавляет классификацию потенциальных агентов биотерроризма среди возбудителей инфекционных заболеваний бактериальной природы, а события осени 2001 г. в США на практике подтверждают его возможности при использовании в качестве биологического поражающего агента.

В сложившихся условиях повышенного риска возникновения вспышек инфекционных заболеваний природного и техногенного характера важную роль играет своевременная и точная лабораторная диагностика. Существующие бактериологические и иммунологические методы идентификации B.anthracis недостаточно эффективны для экспресс-диагностики. В связи с этим разработка чувствительных, специфичных, воспроизводимых и легко применимых методов лабораторной идентификации возбудителя сибирской язвы является актуальной задачей.

На сегодняшний день в отечественной литературе описаны несколько тест-систем для идентификации B.anthracis методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Указанные амплификационные тест-системы представлены в виде классической ПЦР с детекцией результатов анализа методом гель-электрофореза. Данные по конструированию и испытаниям тест-систем для идентификации возбудителя сибирской язвы методом ПЦР в реальном времени в открытой отечественной литературе отсутствуют.

Представлены результаты разработки и испытаний молекулярно-биологической тест-системы для выявления ДНК возбудителя сибирской язвы методом полимеразной цепной реакции в реальном времени. На примере водных суспензий суточных агаровых культур штаммов сибиреязвенного микроба, близкородственных и гетерологичных видов микроорганизмов, а также клинического материала от экспериментальных животных показаны высокая чувствительность, специфичность и воспроизводимость результатов анализа с использованием данной тест-системы. Подтверждена сохраняемость основных характеристик тест-системы при хранении ее при 22±2°С в течение 12 месяцев. (См. статью: Абрамов Д.Д. с соавт. "Разработка и испытания молекулярно-биологической тест-системы для выявления ДНК возбудителя сибирской язвы методом полимеразной цепной реакции в реальном времени").

"Клин. лаб. диагностика", 2011, № 3, с. 46 - 50.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий