Морфологическая и кариологическая характеристики клеток MDCK и Vero(B) при культивировании в питательных средах на основе растительных гидролизатов

Создание и аттестация клеточных субстратов являются актуальными аспектами разработки и производства иммунобиологических препаратов, в том числе культуральных вакцин. Применение первичных и диплоидных культур клеток не может в полной мере обеспечить растущие потребности практического здравоохранения в эффективных, безопасных и экономичных вакцинных препаратах. Наиболее перспективным направлением биотехнологии в настоящее время считается внедрение в практику перевиваемых культур клеток, аттестованных в соответствии с требованиями Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ). Перевиваемые культуры клеток почки коккер-спаниэля (MDCK) и зеленой мартышки (Vero(B)) успешно используются в качестве субстрата для изготовления вакцин. Для их культивирования применяют бессывороточные питательные среды импортного производства или среды, содержащие импортную эмбриональную телячью сыворотку. Применение дорогостоящих импортных питательных сред и сывороток в отечественных технологиях производства культуральных гриппозных вакцин нерентабельно.

Проведено сравнительное изучение кариологических, морфологических и пролиферативных характеристик перевиваемых культур клеток MDCK и Vero(B) при культивировании в течение 10 пассажей в питательных средах на основе гидролизатов соевой муки, полученных с использованием ферментов животного (трипсин) и растительного (бромелайн) происхождения, на основе гидролизатов рисовой муки, полученных с использованием трипсина, и в контрольных средах (DMEM и SFM4 MegaVir). Исследуемые среды ( с добавлением 3% эмбриональной телячьей сыворотки «Gibco», США) обладали высокими ростстимулирующими свойствами в отношении культуры клеток Vero(B) и не влияли на их морфологию. Клетки Vero(B) после культивирования в течение 10 пассажей в экспериментальных питательных средах сохраняли стабильный кариотип. Культивирование клеток MDCK в питательных средах на основе ферментативных гидролизатов рисовой и соевой муки с пониженным (2%) содержанием эмбриональной телячьей сыворотки «Gibco» не привело к существенным изменениям индексов пролиферации, а также морфологических и кариологических характеристик клеток культуры. (См. статью: Михайлова Г.Р с соавт. "Морфологическая и кариологическая характеристики клеток MDCK и Vero(B) при культивировании в питательных средах на основе растительных гидролизатов").

"Вопр. вирусол.", 2011, № 2, с. 9 - 14.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий