Разработка тест-системы для серодиагностики иерсиниозов методом иммуноблота

С целью подтверждения диагноза в острый период иерсиниоза применяют бактериологический метод, исследуя биологические выделения или биопсийный материал при хирургических вмешательствах. Однако эффективность бактериологического метода невысока и составляет 7-10%. В нашей стране для экспресс-диагностики в остром периоде заболевания используют метод полимеразной цепной реакции, однако в поздние сроки болезни его эффективность снижается. При затяжном течении иерсиниоза, как правило, в выделениях больного не обнаруживают антигены иерсиний. В практической медицине для подтверждения диагноза широкое применение получили серологические методы: реакция агглютинации (РА) и реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). С помощью этих методов иерсиниозы подтверждают в 46-80% случаев, по данным разных авторов. Следует отметить, что препараты для этих реакций получены на основе антигенов преимущественно липополисахаридной природы. Вместе с тем известно, что при начальных этапах взаимодействия Yersinia pseudotuberculosis с макроорганизмом, и особенно в процессе инвазии и их размножения в организме хозяина, важную роль играют белки наружной мембраны (Yersinia outer membrane proteins, Yops), детерминированные хромосомным inv-геном и генами плазмиды вирулентности иерсиний pYV 45-47 МД. Последняя обнаруживается только у вирулентных бактерий рода Yersinia. При постановке РА и РНГА не учитывают также низкие титры из-за возможных перекрестных реакций с другими бактериями (Brucella, Escherichia, Salmonella, Borrelia), однако при этом возможно наличие иерсиниозных антител, особенно при хроническом течении. В последнее время широкое применение получил иммуноферментный анализ (ИФА), эффективность которого наиболее высока в острый период болезни. Для установления диагноза при хроническом течении иерсиниозной инфекции, равно как для изучения перекрестной реактивности Yersinia с другими видами бактерий, за рубежом (США, Германия) применяют высокоспецифичный и высокочувствительный метод иммуноблота с использованием Yops Yersinia. Предложенные зарубежные коммерческие тест-системы для поиска антител к Yersinia методом иммуноблота являются дорогостоящими и часто недоступными для практических лабораторий.

Разработана экономичная отечественная тест-система для серодиагностики иерсиниозов методом иммуноблота, в качестве антигенов применили рекомбинантные белки наружной мембраны Yersinia: YopH (51кД), YopM (44 кД), YopD (35 кД) и YopE (23 кД). По сравнению с РНГА, РА и ИФА метод иммуноблота имеет высокие показатели чувствительности и специфичности и может быть перспективен преимущественно для диагностики хронических форм иерсиниозной инфекции. (См. статью: Кокорина Г.И. с соавт. "Разработка тест-системы для серодиагностики иерсиниозов методом иммуноблота").

"Эпидемиол. и инфекц. болезни", 2011, № 4, с. 18 - 23.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий