Прием экспресс-анализа mix-культур возбудителей чумы и псевдотуберкулеза

В природных очагах возбудитель чумы (Yersinia pestis) может циркулировать одновременно с возбудителем псевдотуберкулеза (Yersinia pseudotuberculosis). При снижении эпизоотической активности чумного очага в организме иммунорезистентных теплокровных носителей, в блохах-переносчиках, в простейших, обитающих в почве нор грызунов, могут появляться измененные варианты чумного микроба. Эти формы Y.pestis порой затруднительно отличить от возбудителя псевдотуберкулеза (Y.psdtbc). Особенно если штаммы Y.рsdtbc имеют отклонения от типичного фенотипа, характерные для изолятов от крыс и других грызунов. От инфицированных обеими иерсиниями грызунов или блох выделяются mix-культуры, которые могут экспрессировать атипичный "общий" фенотип, отличающийся непостоянством. При пересевах в нарастающей степени доминируют бактерии псевдотуберкулеза, постепенно вытесняя при пересевах бактерии чумы. При постановке биопроб, напротив, нарастает доля бактерий чумы. Полной элиминации микроба того или другого вида не наблюдается и сохраняется малая доля Y.pestis или Y.psdtbc. По этой причине остро стоит проблема детекции и идентификации смешанных культур этих иерсиний. Исследование таких внешне однородных культур с помощью принятых в практике дифференциальных тестов весьма затруднительно. Некоторые из них из-за упомянутой вариабельности фенотипа не всегда надежны. Это может привести к гипердиагностике чумы, а в худшем случае позволит упустить ее возбудителя. Основные иммунологические тесты для детекции и идентификации Y.pestis основаны на использовании высокоспецифичного F1-антигена (Fra) и антител к нему. Но они зачастую не эффективны при детекции и дифференциации измененных штаммов от возбудителя псевдотуберкулеза, особенно в смешанных культурах. Ранее авторами статьи была показана высокая эффективность приема дифференциации типичных и «бесфракционных» штаммов Y.pestis от Y.psdtbc с помощью иммунологического теста на FV-антиген, специфический для всех штаммов чумного микроба, и ПЦР с видоспецифическими праймерами "vlm12" и "JS".

Предлагается использовать для экспресс-анализа mix-культур возбудителей чумы и псевдотуберкулеза полимеразную цепную реакцию со смесью двух пар "хромосомных" праймеров "vlm12for"/IS216rev" и "JSfor"/"JSrev", соответственно видоспецифических для Y.pestis и Y.psdtbc, с последующей дополнительной иммунодиагностикой дефектных и полноценных по синтезу F1-антигена бактерий чумы в реакции объемной агломерации и коагглютинации с диагностикумами на антигены: плазмидозависимый F1 и детерминируемый хромосомой FV. Этот прием отличает большая эффективность и меньшая трудоемкость. Он ускоряет детекцию смеси двух возбудителей в посевах, органах биопроб и других материалах, облегчает анализ mix-культур возбудителей чумы и псевдотуберкулеза, полученных в «смешанных» очагах, идентификацию составляющих, дифференциацию и выделение чистых культур обеих иерсиний. (См. статью: Трухачев А.Л. с соавт. "Прием экспресс-анализа mix-культур возбудителей чумы и псевдотуберкулеза").

"Клин. лаб. диагностика", 2011, № 7, с. 47 - 49.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий