Стандартизация методики определения продукции цитокинов клетками крови ex vivo

Интерес к цитокиновой системе регуляции защитных функций организма человека неуклонно растет, о чем свидетельствует постоянно возрастающее количество публикуемых оригинальных статей, обзоров и монографий. Большая часть этих работ посвящена изучению цитокинов в кровотоке, полученные при этом данные отражают текущее состояние иммунной системы. Однако статей с результатами исследования способности клеток крови к секреции цитокинов в ситуациях, сопряженных с дефицитом или дисбалансом регуляторных факторов, опубликовано значительно меньше, оценка цитокинового статуса в таких случаях является актуальной задачей клинической лабораторной диагностики. В последние годы для таких исследований в лабораториях стали более широко использовать метод ex vivo, в котором для анализа берут пробы цельной крови без выделения мононуклеарных клеток. Это упрощает проведение анализа и снижает вероятность нежелательной активации и гибели мононуклеаров. Кроме того, культивирование клеток крови в данном случае идет в более естественном микроокружении, соответствующем процессу in vivo, при сохранении баланса всех гуморальных факторов. Результаты определения спонтанной продукции цитокинов ex vivo позволяют оценить состояние клеток крови в организме обследуемого пациента. Индуцированная митогеном продукция отражает потенциальные возможности активации клеток, что очень важно для оценки иммунологической реактивности.

Цель настоящего исследования – разработка набора реагентов, содержащего все необходимые компоненты для культивирования и митогенной активации ex vivo клеток цельной крови в клинико-диагностических лабораториях. Использование такого набора позволит получать в стандартных условиях аналитические пробы, предназначенные для определения спонтанной и индуцированной митогенами продукции цитокинов мононуклеарными клетками. Основной задачей работы был выбор митогенов, обеспечивающих наиболее эффективную и стандартизованную стимуляцию различных цитокинов клетками цельной крови.

Разработана стандартизованная методика для определения продукции цитокинов клетками крови ex vivo. Для митогенной активации используется комплекс митогенов фитогемагглютинина Р, фитогемагглютинина М, липополисахарида, конканавалина А. Это позволяет активировать различные типы иммунокомпетентных клеток и индуцировать секрецию представительного ряда цитокинов. Показано, что применение этой методики позволяет получать воспроизводимые результаты секреции цитокинов по стандартизованной процедуре. Определены нормативные значения спонтанной и митогениндуцированной продукции цитокинов клетками крови здорового человека. (См. статью: Рыжикова С.Л. с соавт. "Стандартизация методики определения продукции цитокинов клетками крови ex vivo").

"Клин. лаб. диагностика", 2011, № 11, с. 49 - 53.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий