Разработка способа молекулярной детекции Acinetobacter spp.

Грамотрицательные неферментирующие бактерии являются одними из основных возбудителей внутрибольничных инфекций, наиболее изученной среди них является P.aeruginosa. Однако в последнее время при инфекционных процессах различной локализации все чаще обнаруживаются представители рода Acinetobacter, которые идентифицируются намного позднее. Соответственно начинающаяся антибиотикотерапия бывает, как правило, недостаточно эффективной, поскольку указанные микроорганизмы резистентны к подавляющему большинству применяемых в настоящее время антибиотиков.

Цель работы состояла в разработке и испытании на чистых культурах новых диагностических тест-систем для обнаружения Acinetobacter spp., основанных на молекулярно-генетических технологиях детекции микроорганизмов. Идентификацию бактерий проводили с помощью морфологического, культурального и биохимического ("bioMerieux", Франция) методов. ДНК из образцов чистых культур выделяли набором "ДНКсорб-А" ("Амплисенс", Россия). Подбор праймеров проводился на основе анализа нуклеотидных последовательностей указанных микроорганизмов в международной базе генов EM-BL/GenBank/DDBJ при использовании программ "Primer-select" и "Meg-Align" (США). Проверка на специфичность и чувствительность праймеров выполнялась с помощью ПЦР при тестировании 40 штаммов Acinetobacter spp., идентифицированных по биохимическим признакам. В качестве внутреннего контроля качества параллельно тестировали контрольный штамм P.aeruginosa ATCC 27853.

Подобранные праймеры позволили идентифицировать в качестве Acinetobacter spp. только 22 из 40 протестированных клинических штаммов, что позволяет использовать их в качестве технологической основы при создании тест-систем для экспресс-диагностики. (См. материалы для обсуждения по тезисам: Хасанова Г.Ф. с соавт. "Разработка способа молекулярной детекции Acinetobacter spp.").

"Клин. лаб. диагностика", 2011, № 9, с. 48.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий