Выявление РНК вируса краснухи в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени

Цель работы – разработка набора реагентов для выявления РНК вируса краснухи в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентной детекцией результатов анализа в режиме реального времени (ПЦР-РВ) "АмплиСенс® Rubella virus-FL".

При разработке, определении аналитической специфичности и чувствительности использовали ДНК и РНК 33 различных микроорганизмов, в том числе 4 штаммов вируса краснухи. Сравнение аналитической чувствительности вирусологического и молекулярно-биологического методов проводили с использованием штаммов вируса краснухи Wistar RA 27/3, M-33, "Орлов", Judith. Оценку диагностической информативности выявления РНК вируса краснухи в различном клиническом материале методом ПЦР-РВ проводили в сопоставлении с определением вирусоспецифических антител в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа.

Разработан набор реагентов для выявления РНК вируса краснухи в клиническом материале методом ПЦР-РВ. Аналитическая специфичность составляет 100%, аналитическая чувствительность – 400 копий РНК вируса/мл. Аналитическая чувствительность разработанной методики превышает аналитическую чувствительность метода заражения культуры клеток Vero E6 при исследовании штаммов вируса краснухи Wistar RA 27/3 и "Орлов" на 1 lg и 3 lg, а М-33 и Judith – аналогична. Диагностическая специфичность составляет 100%. Диагностическая чувствительность при тестировании образцов, полученных до 5 дня с момента появления сыпи: для плазмы периферической крови – 20,9%, слюны – 92,5%, назофарингеальных мазков – 70,1%, слюны и назофарингеальных мазков – 97%. Показана предсказательная ценность положительного и отрицательного результата в зависимости от вида тестируемого клинического материала.

Применение набора реагентов позволит повысить эффективность диагностики краснухи на ранних этапах развития инфекционного процесса, своевременно и качественно проводить дифференциальную диагностику экзантемных заболеваний, обосновать тактику противоэпидемического режима. (См. статью: Домонова Э.А. с соавт. "Выявление РНК вируса краснухи в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени").

"Журн. микробиол.", 2012, № 1, с. 60 - 67.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий