Разработка и использование тест-систем для молекулярно-генетической детекции возбудителей внебольничной пневмонии

Этиологию внебольничной пневмонии (ВП) нельзя признать установленной, поскольку частой находкой при этом являются представители нормальной микробиоты, колонизирующей верхние отделы дыхательных путей. В последние годы все шире используются различные варианты полимеразной цепной реакции (ПЦР). Однако даже в этих случаях пока высок процент ложноположительных результатов, что предопределяет необходимость поиска новых генов-мишеней для уверенной диагностики ВП.

Цель работы – поиск новых мишеней и усовершенствование способов молекулярно-генетической детекции в мокроте видоспецифических фрагментов ДНК возбудителей ВП.

Подобраны видоспецифичные олигонуклеотидные праймеры к Streptococus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Branhamella catarrhalis. Бактериологическим методом и при использовании ПЦР протестировано 103 образца мокроты больных ВП и 15 практически здоровых людей.

Бактериологическим методом при ВП в 26 случаях (25,2%) выявлена смешанная бактериальная флора. У 14 больных (13,6%) в мокроте обнаружена B.catarrhalis, у 12 пациентов (11,6%) – S.pneumoniae, H.influenzae была выявлена у 11 обследуемых (10,7%), K.pneumoniae в 8 случаях (7,9%). В 32 случаях (30%) бактериологически этиологию ВП расшифровать не удалось. При использовании ПЦР с разработанными праймерами B.catarrhalis выявлены у 19 (18,5%) больных ВП; S.pneumoniae – у 17 (16,5%); H.influenzae и K.pneumoniae – в 14,5% и 12,6% (15 и 13 пациентов) случаев. В 16,5% случаев (17 больных) методом ПЦР были получены положительные результаты одновременно к нескольким видам бактерий, в 3,9% случаев (4 больных) обнаружены P.aeruginosa.

Применение ПЦР для обнаружения ДНК возбудителей внебольничной пневмонии значительно повышает информативность исследования в сравнении с бактериологическим методом. (См. статью: Мавзютов А.Р. с соавт. "Разработка и использование тест-систем для молекулярно-генетической детекции возбудителей внебольничной пневмонии").

"Журн. микробиол.", 2011, № 6, с. 69 - 72.

Все новости

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий