Микробиологическая (культуральная) диагностика

Классический метод выявления урогенитальных микоплазм – культуральный метод, позволяющий не только обнаружить возбудителя, но и оценить их количественное содержание в исследуемом материале [9,31,37]. Для культивирования используют жидкие, полужидкие (0,3 % агар) и плотные (1,3 % агар) питательные среды. В лабораторной диагностике применяют, как правило, первый и третий варианты. Питательную основу сред составляют пептоны и перевары (например, ферментативный перевар из бычьих сердец). Кроме высококачественной белковой основы, среды для микоплазм должны содержать ряд добавок, играющих роль факторов роста. Для всех видов микоплазм и уреаплазм необходимы стеролы (холестерин и его производные) и жирные кислоты. Микоплазмы нуждаются также в фосфолипидах, гликолипидах и фосфогликолипидах. В жидкие питательные среды для выявления M. Hominis добавляют аргинин, для выявления Ureaplasma spp. – мочевину [5,33]. Эти субстраты при внутриклеточной ферментации приводят к образованию аммиака, что защелачивает питательную среду и визуально фиксируется по изменению цвета pH-индикатора. В плотные питательные среды в качестве дифференцирующего субстрата для визуального обнаружения микоплазм включают сульфат марганца. Рост на этих средах сопровождается образованием оксида марганца, окрашивающего колонии Ureaplasma spp. в коричневый цвет, в то время как колонии M. Hominis остаются бесцветными. Количественную оценку концентрации возбудителей осуществляют путем раститровки биологического материала в жидких или плотных питательных средах [26,62].

Достоинством культуральных методов является их 100 % специфичность и возможность получения чистой культуры для дальнейшего исследования выделенных штаммов [9,33], в частности, испытания их чувствительности к антибиотикам. Необходимо отметить, что на сегодняшний день появились коммерческие отечественные стандартизированные питательные среды и тест-системы для выявления M. Hominis и Ureaplasma spp. и определения их чувствительности к антибиотикам (например, «Микоплазма-50», «Микоплазма-АЧ», «Уреаплазма-50», «Уреаплазма-АЧ» и «Уреа/Мико-Скрин-АЧ» производства ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера; набор «Уро-тест» производства ООО НПО «Иммунотэкс»), подобные зарубежным (например, «MYCOFAST» компании «EliTech»; «MYCOPLASMA DUO» компании «Bio-Rad»; «MYCOPLASMA-IST» компании «BioMerieux»).

Выбрать другой раздел данной публикации
Все публикации

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий