Результаты исследования и их обсуждение

Медиана возраста исследованных мужчин составила 32 [28;38] года, а медиана возраста женщин - 29 [25;33] лет. В результате исследования клинического материала 277 человек методом ПЦР Ureaplasma spp. были обнаружены у 59 человек (21,3 %), M. hominis – у 3 человек (1,1 %), а оба возбудителя: M. hominis и Ureaplasma spp.- у 23 человек (8,3 %). Параллельно с методом ПЦР проводилось культуральное исследование клинического материала. На питательных средах рост только Ureaplasma spp. наблюдался в 68 (24,6 %) случаях. Рост M. hominis был обнаружен в 1 (0,4 %) случае. Оба возбудителя (M. hominis и Ureaplasma spp.) обнаружены у 9 (3,3 %) человек. Частоты обнаружения M. hominis и Ureaplasma spp. у мужчин и женщин КМ и методом ПЦР представлены на рис. 1 и рис. 2.

Общее обнаружение Ureaplasma spp. в клиническом материале составило 82 случая (29,6 %) при использовании метода ПЦР (95 % ДИ по методу Клоппера-Пирсона 22,1 % - 38,4 %) и 77 случаев (27,8 %) при исследовании КМ (95 % ДИ 20,6 % - 36,3 %). Достоверно значимых различий не выявлено [χ2=0,22; р>0,05]. Общее обнаружение M. hominis методом ПЦР составило 26 случаев (9,4 %), а КМ – 10 случаев (3,6 %). Значимость различий составила [χ2=7,61; р=0,0058].

Обнаружение M. hominis и Ureaplasma spp. методом ПЦР в клиническом материале у мужчин и женщин

Рисунок 1. Обнаружение M. hominis и Ureaplasma spp. методом ПЦР в клиническом материале у мужчин и женщин, где по оси Х – группы с обнаруженными микоплазмами; по оси Y – процент их обнаружения.

Обнаружение M. hominis и Ureaplasma spp. культуральным методом в клиническом материале у мужчин и женщин

Рисунок 2. Обнаружение M. hominis и Ureaplasma spp. культуральным методом в клиническом материале у мужчин и женщин, где по оси Х – группы с обнаруженными микоплазмами; по оси Y – процент их обнаружения.

Установлено, что частота выявления M. hominis и Ureaplasma spp. не одинакова у мужчин и женщин. Встречаемость Ureaplasma spp. была достоверно выше у женщин, чем у мужчин. По результатам ПЦР: 48,6 % (52 случая от 107 женщин) против 17,65 % (30 случаев от 170 мужчин), соответственно [χ2=30,19; р<0,00001 (критерий ХИ-квадрат); р<0,00001 (точный критерий Фишера)]. По результатам культурального исследования: 46,7 % (50 случаев от 107 женщин) против 15,9 % (27 случаев от 170 мужчин), соответственно [χ2=31,13; р<0,00001 (критерий ХИ-квадрат); р<0,00001 (точный критерий Фишера)]. Достоверно значимых различий по полу не выявлено в частоте выявления M. Hominis, принимая во внимание культуральные исследования. По результатам ПЦР: 14,02 % (15 случаев от 107 женщин) против 6,47 % (11 случаев от 170 мужчин), соответственно [χ2=4,40; р=0,036 (критерий ХИ-квадрат); р=0,031 (точный критерий Фишера)]. По результатам культурального исследования: 3,7 % (4 случая от 107 женщин) против 3,5 % (6 случаев от 170 мужчин), соответственно [χ2=0,01; р=0,9277 (критерий ХИ-квадрат); р=0,585 (точный критерий Фишера)].

Для положительных проб были определены концентрации возбудителей, которые были разделены на две группы при следующих критериях: в КМ по количеству колониеобразующих единиц в 1 мл – пробы с концентрацией возбудителя менее 104 КОЕ/мл и пробы с концентрацией возбудителя равной и более 104 КОЕ/мл; в методе ПЦР по количеству геномных эквивалентов в 1 мл - пробы с концентрацией возбудителя менее 104 ГЭ/мл и пробы с концентрацией возбудителя равной и более 104 ГЭ/мл. Полученные данные представлены на рис. 3 и рис. 4.

Наиболее часто на питательных средах отмечался рост Ureaplasma spp. в диагностически значимом титре не менее 104 КОЕ/мл - в 70 случаях из 77 положительных клинических образцов (90,9 %), из них в 9 образцах (11,7 %), где наблюдался рост и M. Hominis. При диагностике методом ПЦР Ureaplasma spp. в количестве не менее 104 ГЭ/мл определялся также в 70 из 82 положительных образцов (85,4 %), из них в 18 клинических образцах с микст-инфекцией M. Hominis (21,9 %). Достоверно значимых различий не выявлено [χ2=1,16; р>0,05].

Количественная оценка концентраций урогенитальных микоплазм Ureaplasma spp. и M. hominis  культуральным методом

Рисунок 3. Количественная оценка концентраций урогенитальных микоплазм Ureaplasma spp. и M. Hominis культуральным методом, где по оси Х группы с концентрациями возбудителей менее 104 КОЕ/мл, равной и более 104 КОЕ/мл; по оси Y - процент их обнаружения.

Рост M. Hominis на питательных средах в титре не менее 104 КОЕ/мл также наблюдался наиболее часто - в 9 (90,0 %) из 10 положительных клинических образцов, 8 из них (80,0 %) были в 9 образцах со смешанной с Ureaplasma spp. инфекцией. В ПЦР исследовании M. hominis в количестве не менее 104 ГЭ/мл определялись в 9 из 26 положительных образцов (34,6 %), все из которых обнаруживались в клиническом материале со смешанной с Ureaplasma spp. инфекцией. Значимость различий составила [χ2=7,61; р=0,0029].

Количественная оценка концентраций урогенитальных микоплазм Ureaplasma spp. и M. hominis  методом ПЦР

Рисунок 4. Количественная оценка концентраций урогенитальных микоплазм Ureaplasma spp. и M. hominis методом ПЦР, где по оси Х группы с концентрациями возбудителей менее 104 ГЭ/мл, равной и более 104 ГЭ/мл; по оси Y - процент их обнаружения.

Сравнение результатов исследования клинического материала на выявляемость микоплазменной инфекции методом ПЦР и КМ представлено в таблице 1.

Общее совпадение результатов между двумя методами при обнаружении Ureaplasma spp. составляет 97,5 %. Расхождение результатов отмечалось в 2,5 % случаев. Один случай приходился на положительный вариант посева на питательные среды при отрицательном результате при исследовании методом ПЦР, при этом концентрация Ureaplasma spp. в посеве была низкой и составила 102 КОЕ/мл. Остальные 6 случаев приходились на вариант, когда результат исследования на Ureaplasma spp. методом ПЦР был положительным, но на селективных питательных средах рост отсутствовал, при этом все образцы определялись в количестве не менее 104 ГЭ/мл.

Таблица 1. Сравнение результатов по выявляемости Mycoplasma hominis и Ureaplasma spp. культуральным методом и методом ПЦР

Результаты Ureaplasma spp. M. hominis
Количество %Количество %
КМ «+»
ПЦР «+»
7627,493,25
КМ «-»
ПЦР «-»
19470,025090,25
Совпадение27097,525993,5
КМ «+»
ПЦР «-»
10,410,4
КМ «-»
ПЦР «+»
62,2176,1
Несовпадение72,5186,5

При исследованиях на M. Hominis общее совпадение результатов составило 93,5 %, а несовпадение наблюдалось в 6,5 % случаев. Один случай приходился на положительный вариант посева на питательные среды при отрицательном результате при исследовании методом ПЦР, при этом титр M. Hominis в посеве составил не более 102 КОЕ/мл, что ниже клинически значимого титра. Остальные 17 случаев приходились на вариант, когда результат исследования на M. Hominis методом ПЦР был положительным, но на селективных питательных средах рост отсутствовал, при этом 16 клинических образцов определялись в количестве не более 104 ГЭ/мл, из них количественное содержание 13 образцов было менее чем 102 ГЭ/мл. Из 17 случаев только один образец показал количественное содержание не менее 104 ГЭ/мл.

Выбрать другой раздел данной публикации
Все публикации

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий