Лабораторные методы диагностики урогенитального трихомониаза (обзор литературы)

Махлай Н.С.
  • ФГУН "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера" Роспотребнадзора, Санкт-Петербург.

Резюме. Лабораторная диагностика трихомониаза - обязательная составляющая при постановке диагноза урогенитальный трихомоноз. Обзор освещает диагностические методы, направленные на выявление простейшего, антигенов T.vaginalis, специфических антител и ДНК возбудителя. Отражены существующие проблемы в интерпретации результатов и сведения об эффективности применения того или иного метода в алгоритме обследования пациентов.

Ключевые слова: лабораторная диагностика, урогенитальный трихомониаз.

The laboratory diagnostic of genitourinary trichomoniasis (literature review)

N.S. Makhlay.

Abstract. The laboratory diagnostics of trichomoniasis is strongly recommended for the diagnosis confirmation. Current review summarizes diagnostic methods directed to identification by morphology of protozoa, by antigenic properties of T.vaginalis, by specific antibodies and by the pathogen DNA detection. Overview reflects the existing problems in the interpretation of results and information about the efficacy of each method in the patient's examination algorithm.

Key words: laboratory diagnostics, urogenital trichomoniasis.

Трихомониаз в структуре ИППП

Одно из центральных мест в структуре заболеваемости инфекциями, передающимися половым путем, занимает трихомоноз. Он широко распространен в странах Африки, Южной и Юго-Восточной Азии, а также в странах с большим притоком эмигрантов. В последние годы продолжается положительная тенденция к снижению уровня заболеваемости трихомонозом, однако отмечается рост скрытых и малосимптомных форм инфекции, затрудняющих своевременную диагностику трихомониаза и лечение [7,11].

Особенно распространен трихомоноз среди женщин [33], однако вопрос о значении T.vaginalis в патологии беременности остается открытым из-за противоречивости информации по этому вопросу [23,26]. Клиническая картина урогенитального трихомоноза характеризуется отсутствием специфических признаков и примерно у 50 % инфицированных трихомонозом имеет место бессимптомный характер течения заболевания, т.е. возможно трихомонадоносительство [49]. Недовыявление трихомонад - причина неконтролируемого их распространения среди сексуально активного населения. В результате это приводит к развитию хронических орхоэпидидимитов и простатитов у мужчин, а также хронических аднекситов у женщин, что в итоге может служить причиной бесплодия, невынашивания беременности, патологии новорожденных [25,29].

Трихомоноз имеет важное медицинское, социальное и экономическое значение не только из-за высокой распространенности инфекции, но и из-за доказанной роли T.vaginalis как кофактора ВИЧ-инфекции и рака шейки матки [33].

Сравнительный анализ лабораторных методов диагностики трихомониаза

Диагностика урогенитального трихомониаза основывается на обнаружении в исследуемом материале T.vaginalis. Диагноз не может быть поставлен исключительно на основании клинической картины, поскольку патогномоничные симптомы встречаются только у 2 % пациенток. Ещё в 1980 году были представлены результаты, свидетельствующие о том, что если диагноз трихомоноза устанавливать только на основании клинической картины, то 88 % инфицированных T.vaginalis женщин будет дан ложноотрицательный результат, а у 29 % неинфицированных диагноз был бы поставлен ошибочно [27]. В связи с тем, что клинические симптомы зачастую не отражают реальной картины заболевания, в обязательном порядке необходимо применение лабораторных методов диагностики трихомониаза, причем актуальна задача своевременного проведения исследования.

До настоящего времени в соответствии с протоколом ведения больных урогенитальным трихомониазом [14] основными методами обнаружения трихомонад являются микроскопический и культуральный, т.е. прямая идентификация возбудителя в мазке либо при культивировании на питательной среде. Но сложилась парадоксальная ситуация: при высоком уровне заболеваемости трихомонозом в России отсутствует производственный выпуск стандартных, разрешенных к применению препаратов и питательных сред для диагностики трихомониаза. В практике используют зарубежные среды, что влияет на стоимость исследования, или приготовленные по прописям в лабораториях, что влияет на воспроизводимость и достоверность получаемых результатов.

Диагностика трихомониаза существенно осложнилась в последние годы в связи с распространенностью нетипичных округлых форм T.vaginalis, обнаруживаемых при световой микроскопии витальных препаратов [3].

Роль микроскопического метода при постановке диагноза

Исторически микроскопия - это первый метод в лабораторной диагностике трихомоноза. Его использование экономически целесообразно в силу простоты и возможности одновременного просмотра мазка и на другие возбудители. Микроскопия может производиться в нативном препарате или в препарате, окрашенном по различным методикам. Нативный препарат необходимо исследовать в течение 10 минут после забора материала, поскольку утрачивается подвижность возбудителя, клетка округляется и получение однозначного результата затрудняется [30]. В положительных случаях микроскопии нативного препарата трихомонады обнаруживаются в виде грушевидной, овальной или округлой формы по величине несколько превосходящей лейкоциты [5]. Для подвижных форм характерны толчкообразные движения за счет жгутиков и ундулирующей мембраны, которые особенно хорошо видны при исследовании в микроскопе с темнопольным конденсором. Необходимо отличать подвижность T.vaginalis от подвижных жгутиковых представителей семейства Bodonidae. Подвижные бактерии, прикрепленные к лейкоцитам и создающие ложное впечатление движения, также вероятно ошибочно идентифицировать как крупную трихомонаду.

Микроскопия окрашенных препаратов несколько повышает процент выявления трихомонад по сравнению с нативными препаратами в силу того, что учитываются не только типичные жгутиковые, но и амастиготные формы. Кроме того окрашенные препараты можно использовать для косвенной оценки воспалительного процесса - скопление лейкоцитов на клетках плоского эпителия или вокруг них. Еще один косвенный признак урогенитального трихомоноза - наличие большого количества слизи в исследуемом материале [6]. Правда, с увеличением количества лейкоцитов в отделяемом из уретры у мужчин больных урогенитальным трихомонозом, вероятность получения ложноположительных результатов культуральным и микроскопическим методами увеличивается [12].

В препаратах, окрашенных метиленовым синим, трихомонады наблюдаются в виде округлой или овальной формы, расположенные в слизи между клеточными элементами. Четко просматривается оболочка паразитов, эксцентрично расположенное ядро, интенсивно окрашенное в синий цвет, протоплазма - светло-синяя, вакуоли - бесцветные. При таком способе окраски трихомонады имеют характерный вид и хорошо распознаются [8]. Для более детального просмотра клетки и выявления хорошо идентифицируемых жгутиков следует использовать дифференциальные методы окраски по Романовскому-Гимзе, Лейшману.

В целом микроскопия нативного препарата считается высокоспецифичным тестом (99,8 %), но имеет низкую чувствительность - от 38 % до 82 %. [1,10 ,17,48]. Во многом это связано с высокой долей субъективизма при визуальной оценке результатов.

Питательные среды для культурального исследования

В связи с низкой чувствительностью микроскопического метода и в соответствии с протоколом ведения больных урогенитльным трихомониазом [14] идентификацию T.vaginalis следует проводить культуральным методом, считающимся, по мнению большинства исследователей, "золотым стандартом".

Первое in vitro культивирование T.vaginalis было проведено в 1915 г [36]. С тех пор разработаны разные варианты жидких и полужидких питательных сред для диагностики трихомониаза: среда Джонсона-Трасселя (СPLM), Даймонд среда, модифицированная Даймонд среда с добавлением тиогликолята натрия, среда Купферберг STS, среда Купферберг Difco, среда InPouch TV, среда TYM.

Известна попытка создания бессывороточной питательной среды для культивирования трихомонад [35]. Была предложена синтетическая питательная среда, в которой лошадиная сыворотка была заменена на бычий сывороточный альбумин и холестерин, совместно либо с глицериновыми жирными кислотами, либо со смесью жирных кислот. Однако на такой модифицированной среде скорость роста и урожай T.vaginalis были низкими.

В 70-80-х годах прошлого века в отделе микробиологии ЦНИИКВИ была разработана модифицированная среда Джонсона-Трасселя - среда СКДС [5]. В состав этой среды входят: смесь гидролизата казеина и гидролизина или аминопептида, отходы фармацевтической промышленности при изготовлении лизоцима, ферментативный гидролизат биомассы микроорганизмов, а также экстракт кормовых дрожжей. Коммерчески среда СКДС не выпускается.

В настоящее время отечественные производители выпускают следующие готовые питательные среды: питательная среда для выявления влагалищных трихомонад (ООО "Диагност-Мед", г. Омск), основа питательной среды для культивирования трихомонад (НПО "Микроген", г. Махачкала) и питательная среда СВТ для визуальной диагностики трихомониаза (НИИЭМ имени Пастера, г. Санкт-Петербург).

Исследования, посвященные сравнению питательных сред, немногочисленны. Так, в США в 1989 г. были проведены сравнительные испытания питательных сред, используемых для культивирования T.vaginalis. В качестве посевного материала они использовали клинические образцы вагинальных секретов от больных трихомонозом [43]. Частота обнаружения на разных питательных средах была следующей: Даймонд среда (93,9 %), модифицированная Даймонд среда с добавлением тиогликолята натрия (92,3 %), среда Купферберг STS (38,5 %) и среда Купферберг Difco (49,2 %). Были отмечены высокие ростовые свойства питательной среды Даймонд и положительный эффект добавления. Авторы, однако, указывают на низкую селективность исследованных питательных сред в отношении дрожжеподобных грибов (в 32 % случаев наблюдался рост дрожжеподобных грибов).

В Англии в 1997 г было проведено сравнительное исследование чувствительности питательных сред InPouch TV, Diamond и Джонсона-Трасселя [21]. В 4 мл каждой из трех сред добавляли по 30 мкл инокулюма. Результат оценивали на первые, вторые и четвертые сутки. Было показано, что наибольшей чувствительностью обладает питательная среда InPouch TV (87 %) по сравнению с Diamond (60 %) и Джонсона-Трасселя (57 %).

Культуральная диагностика трихомониаза напрямую зависит от выпускаемых питательных сред. В оптимальном алгоритме лабораторной диагностики обязательной ступенью должно быть культуральное исследование, причем с использованием качественных стандартизированных питательных сред [9]. Этот вывод подтверждается исследованиями, проведенными в 1990 г в ЦНИКВИ [2], которые показали, что подавляющее число больных трихомонозом (72,8 %), как среди женщин, так и среди мужчин, были выявлены при использовании культурального метода.

Методы, основанные на выявлении антигенов

Использование иммунохимических методов обнаружения антигенов возбудителя, таких как иммуноферментный анализ (ИФА) и реакция иммунофлуоресценции (РИФ), особенно актуально в случаях невозможности проведения культурального исследования или при расхождении результатов культурального и микроскопического методов.

Было показано, что чувствительность РИФ ниже, чем культурального исследования, но выше микроскопии нативного препарата [44]. Однако эта во многом субъективная методика к тому же требует отдельной обработки каждого мазка и люминесцентного микроскопа. Одновременная обработка всех проб в планшете и автоматическая детекция цветовых продуктов ферментативной реакции исправили некоторые основные недостатки РИФ.

В работах 80-х годов ИФА давал соизмеримый с культуральным методом процент положительных результатов. Однако авторы указывали, что из-за очевидной гетерогенности изолятов T.vaginalis при описываемых ими условиях ни один из них не имеет моноклональных антител, способных связываться с антигенами в клинических образцах [31,47]. Использование в качестве антигена отдельных иммуногенных белков для получения моноклональных антител несколько изменило сложившееся представление, и была продемонстрирована возможность обнаружения почти 90 % из протестированных клинических изолятов с положительным ответом.

Кроме того, явное преимущество этого метода перед методом "золотого стандарта" - это отсутствие строгих температурных требований. Авторы отмечают, что, возможно, важным звеном в получении достоверного результата служит процедура получения клинического материала, и важно использовать для образца буферный раствор, вследствие того, что помещение организма в фосфатно-солевой буферный раствор позволяет ему освобождать антигенную детерминанту, необходимую для связывания с антителом. Из этого следует, что ранее приписываемая гетерогенность T.vaginalis может быть обусловлена недоступностью антигенных детерминант для антитела, а не отсутствием антигена на поверхности трихомонады [34].

Стоит подчеркнуть, что в России отсутствуют коммерческие разрешенные к применению ИФА и РИФ тест-системы для диагностики трихомониаза.

Диагностическая ценность серологического метода

Изучением иммунологии трихомоноза занимаются уже долгое время [3]. В литературе мало информации о природе иммунного ответа при трихомонозе, неизвестно влияние макро и микроорганизмов на наличие или отсутствие симптомов. Однако понятно, что природа этого механизма неоднозначна и многообразна [20].

Большая часть противотрихомонадных антител принадлежит к IgG-классу [37]. Тем не менее, в сыворотках больных женщин выявляют повышенное содержание специфических IgM, и IgA антител, а при остром трихомонозе в вагинальных смывах отмечается увеличение IgA [28]. Для определения противотрихомонадных антител у пациентов в разные годы пытались использовать реакцию связывания комплимента (РСК) [18], внутрикожную пробу [8], реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА) [32, 37, 38], реакцию непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ) [13].

В 1981 году для серодиагностики трихомоноза впервые был использован метод иммуноферментного анализа (ИФА). При использовании в качестве "подложки" цельноклеточного антигена чувствительность составила всего 80,4 % [45]. Позднее были предприняты попытки использовать в качестве антигена цистеиновые протеиназы T.vaginalis, поскольку предполагается, что они вовлечены в патогенез. Специфичность в этом случае составила 100 %, однако чувствительность не превысила 90 % [20, 46].

В России подобных работ не проводилось, и, по мнению наших исследователей, чувствительность метода составляет чуть более 30 %, и его использование может быть рекомендовано только в качестве вспомогательного теста [16]. Низкая эффективность серологических методов в диагностике трихомониаза связана также с тем, что антитрихомонадные антитела могут циркулировать в сыворотке крови в течение длительного времени после лечения, а значит, практически невозможно дифференцировать текущую и пролеченную формы заболевания [19].

Методы, основанные на выявлении нуклеиновых кислот. Методы генодиагностики на основе определения специфических нуклеотидных последовательностей (мишеней) ДНК возбудителя появились сравнительно недавно. Уже в 1992 Riley D. E. впервые сообщил об использовании ПЦР в диагностике трихомоноза [41]. В работе было показано, что этот метод при использовании электрофоретического способа регистрации результатов помогает выявлять от 10 до 100 трихомонад в исследуемом материале.

Чувствительность и специфичность ПЦР во многом обусловлена правильным выбором мишеней для амплификации [42]. В наибольшей степени исследованные локусы в геномах простейших - это гены рибосомальных РНК, отличающиеся мультикопийностью (254 копии 18S рРНК/на клетку T.vaginalis) [22]. Наряду с геном 18S pРНК исследован ген бета-тубулина T.vaginalis. Использование праймеров из этого гена обеспечивало чувствительность равную 98 % в сравнении с культуральным методом системы InPouch [39]. Вместе с тем, оценивая эффективность праймеров, следует учитывать генетически обусловленную внутривидовую вариабельность Т.vaginalis. Сравнение пяти наборов диагностических праймеров показало, что чувствительность ПЦР, в первую очередь, зависит от выбора праймеров и, в меньшей степени, от способа регистрации результата: иммуноферментный метод детекции продуктов ПЦР показал лучший результат, чем электрофорез в геле [24].

Согласно современным представлениям, применение метода ПЦР оправдано при диагностике латентного течения трихомоноза, для выявления Т.vaginalis при микст-инфекции урогенитального тракта, при скрининговых исследованиях (в комплексе с микроскопическим методом), а также для контроля качества микроскопического исследования. В целом, эффективность диагностики существенно повышается при использовании ПЦР в сочетании с культуральным и/или микроскопическими методами исследования.

Заключение

Из-за отсутствия четкой клинической картины при хронических и стертых формах трихомоноза только лабораторные методы выявляют этиологический агент и устанавливают диагноз заболевания. В лабораторной диагностике острого трихомоноза при наличии в исследуемом материале типичных форм паразитов микробиологические методы дают однозначно интерпретируемые результаты, тогда как хронический трихомоноз, обусловленный неподвижными округлыми трихомонадами, представляет определенные трудности и требует использования комплекса лабораторных методов. Отметим, что, при очевидных преимуществах ПЦР, основным референс методом остается культуральное исследование.

Литература
  1. Боровкова Л. В., Челнокова Е.В Современные методы диагностики и лечения инфекций, передающихся половым путем // Журн. Медицинский альманах. - 2010. - №2. - С. 150 - 155.
  2. Васильев М. М. Особенности клиники мочеполового трихомоноза, совершенствование диагностики и лечения (клинико-экспериментальное исследование): автореф. дис. д-ра мед. наук. - Москва, 1990. - 40с.
  3. Градова Н.Б. Лабораторный практикум по общей микробиологии. - М.: Медицина, 2004. - 144с.
  4. Дмитриев Г.А. Лабораторная диагностика бактериальных урогенитальных инфекций. - М.: Медицинская книга, 2003. - 329 с.
  5. Дмитриев Г.А., Глазко И.И. Диагностика инфекций, передаваемых половым путем. - М., 2007. - 320 с.
  6. Ермоленко Д. К., Исаков В. А., Рыбалкин С. Б., Смирнова Т. С., Захаркив Ю.Ф. Урогенитальный трихомониаз: Пособие для врачей. - СПб, 2007. - 96 с.
  7. Иванова М.А. Анализ заболеваемости населения Российской Федерации инфекциями, передаваемыми половым путем, за период с 1997 по 2008 гг. // Социальные аспекты здоровья населения. - 2009. - № 3.
  8. Ильин И.И. Негонококковые уретриты у мужчин. - М.: Медицина, 1991. - 228с.
  9. Козлюк А.С., Козлюк В.А. Цитоморфологическая диагностика урогенитального трихомониаза // Инфекции передаваемые половым путем. - 2001. - № 6. - С. 26 - 29.
  10. Копылов В.М., Бочкарев Е.Г., Говорун В.М. Урогенитальный трихомониаз. Актуальные вопросы диагностики и лечения (пособие для врачей). - М., 2001. - 41с.
  11. Кубанова А.А., Лесная И.Н., Кубанов А.А., Мелехина Л.Е., Каспирович М.А. Анализ эпидемиологической ситуации и динамика заболеваемости инфекциями, передаваемыми половым путем, и дерматозами на территории Российской Федерации // Вестник дерматологии и венерологии. - 2010. - № 5. - С. 4 - 21.
  12. Мустафина Г.Р. Информативность методов диагностики урогенитального трихомониаза и обоснование показаний к применению ПЦР в реальном времени: автореф. дис. канд. мед. наук. - Уфа, 2010. - 24 с.
  13. Петров П.П. Серологическое изучение мочеполового трихомонадоза: автореф. дис. канд. мед. наук. - Москва, 1969. - 20 с.
  14. Протокол ведения больных урогенитальным трихомониазом // Утв. МИНЗДРАВСОЦРАЗВИТИЯ РФ 14.01.2005.
  15. Раздольская Н.В. Диагностическое значение цитоморфологических, культуральных и иммуногенных свойств T.vaginalis: автореф. дис. канд. биол. наук. - Спб, 2009. - 23 с.
  16. Теличко И.Н., Иванов А.М., Раздольская Н.В., Раводин Р.А., Базолина Е.А. Перспективы серологической диагностики трихомониаза // Медицинская иммунология. - 2007. - № 2 - 3. - С. 249 - 250.
  17. Юнусова Е.И. Диагностика урогенитального трихомониаза // Журн. Практическая Медицина. - 2009. - №5. - С. 43 - 46.
  18. Якимээс Х.П. РСК и внутрикожная проба при трихомонозе урогенитального тракта: автореф. дис. канд. мед. наук. - Таллин, 1965. - 21с.
  19. Яцуха М.В. Некоторые аспекты эпидемиологии трихомоноза // Вестник дерматологии и венерологии. - 1989. - №1. - С. 9 - 36.
  20. Alderete J.F., Newton E., Dennis C., Neale K.A. Antibody in sera of patients infected with Trichomonas vaginalis is to trichomonad proteinases // Genitourin Med. - 1991. - Vol. 67. - P. 331 - 334.
  21. Borchardt K., Zhang M., Shing H. A comparison of the sensitivity of the InPouch TV, Diamond's and Trichosel media for detection of Trichomonas vaginalis // Genitourin Med. - 1997. - Vol. 4. - P. 297 - 298.
  22. Carlton J.M., Hirt R.P., Silva J.C., Delcher A.L. Draft genome sequence of the sexually transmitted pathogen Trichomonas vaginalis // Science. - 2007. - Vol. 12. - P. 207 - 212.
  23. Cotch M.F. Trichomonas vaginalis associated with low birth weight and preterm delivery // Sex. Transm. Dis. - 1997. - Vol. 24. - P. 353 - 360.
  24. Crucitti T., Van Dyck E., Tehe A. Comparison of culture and different PCR assays for detection of Trichomonas vaginalis in self collected vaginal swab specimens // Sex. Transm. Infect. - 2003. - Vol. 79. - P. 393 - 398.
  25. Grodstein F., Goldman M., Cramer D. Relation of tubal infertility to a history of sexually transmitted diseases // Am. J. Epidemiol. - 1993. - Vol.137. - P. 577 - 584.
  26. Gülmezoglu A.M. Interventions for trichomoniasis in pregnancy // Cochrane Database Syst. Rev. - 2000. - Vol. 2. - CD000218.
  27. Fouts A., Kraus S. Trichomonas vaginalis: reevaluation of its clinical presentation and laboratory diagnosis // J. Infect. Dis. - 1980. - Vol. 141. - P.137 - 143.
  28. Kaur S., Khurana S., Bagga R, Wanchu A., Malla N. Antitrichomonas IgG, IgM, IgA, and IgG subclass responses in human intravaginal trichomoniasis // Parasitol. Res. - 2008. - Vol. 103. - P. 305 - 312.
  29. Kharsany A.B., Hoosen A. A., Moodley J., Bagaratee J., Gouws E. The association between sexually transmitted pathogens and cervical intra-epithelial neoplasia in a developing community // Genitourin. Med. - 1993. - Vol. 69. - P. 357 - 360.
  30. Kingston M.A., Bansal D., Carlin E.M. "Shelf life" of Trichomonas vaginalis // Int. J. of STD and AIDS. - 2003. - Vol. 14. - P. 28 - 29.
  31. Krieger J.N., Holmes K. K., Spence M. R., Rein M. F., McCormack W. M., Tam M. R. Geographic variation among isolates of Trichomonas vaginalis: demonstration of antigenic heterogeneity by using monoclonal antibodies and the indirect immunofluorescence technique // J. Infect. Dis. - 1985. - Vol. 152. - P. 979 - 984.
  32. Kuberski T. Evaluation of the indirect hemagglutination technique for study of Trichomonas vaginalis infections, particularly in men // Sex. Transm. Dis. - 1978. - Vol. 5. - P. 97 - 102.
  33. Lewis D. A Trichomoniasis // Vaginal infections. - 2010. - Vol. 3. - P. 291 - 292.
  34. Lisi P.J., Dondero R.S., Kwiatkoski D., Spence M.R., Rein M.F., Alderete J.F. Monoclonal-Antibody-Based Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Trichomonas vaginalis // J. Clin. Microbiol. - 1988. - Vol. 26. - P. 1684 - 1686.
  35. Listead D. New defined and semi-defined media for cultivation of the flagellate Trichomonas vaginalis // Parasitology. - 1981. - Vol. 83. - P. 125 - 137.
  36. Lynch K. M., Trichomoniasis of the Vagina and the Mouth. Cultivation of the Causative Organism and Experimental Infection // Am. J. Trop. Dis. and Prevent. Med. - 1915. - Vol. 2. - P. 627 - 634.
  37. Mason P.R. Serodiagnosis of Trichomonas vaginalis infection by the indirect fluorescent antibody test // J. Clin. Pathol. - 1979. - Vol. 32. - P. 1211 - 1215.
  38. Mathews H.M., Healy G.R. Evaluation of two serological tests for Trichomonas vaginalis infection // Ј. Clin. Microbiology. - 1983. - Vol.17. - P. 840 - 843.
  39. Miller G.A., Klausner J.D., Coates T.J., Meza R., Gaydos C.A., Hardick J., Leon S., Caceres C.F. Assessment of a rapid antigen detection system for Trichomonas vaginalis infection // Clin. Diagn. Lab. Immunol. - 2003. - Vol.10. - P. 1157 - 1158.
  40. Petrin D., Delgaty K., Bhatt R., Garber G. Clinical and micribiological aspects of Trichomonas vaginalis.// Clin. Microb. Reviews. - 1998. - Vol.11. - Р. 300 - 317.
  41. Riley D.E., Krieger J.N. Rapid and practical DNA isolation from Trichomonas vaginalis and other nuclease-rich protozoa // Mol. Biochem. Parasitol. - 1992. - Vol. 51. - P. 161 - 163.
  42. Ryu J.S., Chung H.L., Min D.Y., Cho Y.H., Ro Y.S., Kim S.R. Diagnosis of trichomoniasis by polymerase chain reaction // Yonsei Med. J. - 1999. - Vol. 40. - P. 56 - 60.
  43. Schmid G.P, Matheny L.C, Zaidi A.A, Kraus S.J. Evaluation of six media for the growth of Trichomonas vaginalis from vaginal secretions // J. Clin. Microbiol. - 1989. - Vol. 27. - P. 1230 - 1233.
  44. Smith R.F. Detection of Trichomonas vaginalis in vaginal specimens by direct immunofluorescence assay // J. Clin. Microbiol. - 1986. - Vol. 4. - P. 1107 - 1108.
  45. Street D.A., Taylor-Robinson D., Ackers J.P. Evaluation of an enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of antibody to Trichomonas vaginalis // Br. Ј. Ven. Dis. - 1982. - Vol. 58. - P. 330 - 333.
  46. Tawfeek G.M., Oteifa N.M., el-Gozamy B.R. Evaluation of an IgG cystatin capture enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of anti-cysteine proteinase antibodies in asymptomatic trichomoniasis patients // J. Egypt Soc. Parasitol. - 2003. - Vol. 33. - P. 67 - 83.
  47. Torian B.E., Connelly R.J., Stephens R.S, Stibbs H.H. Specific and common antigens of Trichomonas vaginalis detected by monoclonal antibodies // Infect. Immun. - 1984. - Vol. 43. - P. 270 - 275.
  48. Wiese W., Patel S.R., Patel S.C., Ohl C.A., Estrada C.A. A meta-analysis of the Papanicolaou smear and wet mount for the diagnosis of vaginal trichomoniasis // Am J. Med. - 2000. - Vol. 108. - P. 301 - 308.
  49. World Health Organization. Global prevalence and incudence of selected curable sexually transmitted infections. Overview and estimates // In Global program on AIDS. World Health Organization, Geneva. - 2002. - P. 2 - 27.

Все публикации

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий