Набор для окраски по Циль-Нильсену

Назначение набора для окраски по Циль-Нильсену

Набор для окраски по Циль-Нильсену предназначен для дифференциальной окраски и выявления микроорганизмов с кислотоустойчивыми свойствами, которые обусловлены химическим составом клеточной стенки.

Эти свойства, например, проявляются у некоторых микобактерий.

Набор для окраски по Циль-Нильсену рассчитан на проведение 500 анализов.

Принцип метода окраски по Циль-Нильсену

Принцип метода окраски по Циль-Нильсену основан на способности клеток различных микроорганизмов, предварительно фиксированных и окрашенных при прогревании основным фуксином Циля, прочно удерживать окраску после обработки раствором минеральной кислоты. Кислотоустойчивость обусловлена особенностями химического состава клеточной стенки бактерий: высоким содержанием в ней сложных липидов и, в частности, наличием миколовых кислот.

Состав набора для окраски по Циль-Нильсену

Карболовый фуксин Циля, 25 мл - 1 фл.
Серная кислота, 5%, 25 мл - 1 фл.
Метиленовый синий по Леффлеру, 25 мл - 1 фл.
Инструкция по применению набора для окраски по Циль-Нильсену - 1 шт.

Использование набора для окраски по Циль-Нильсену

Предметное стекло перед исследованием обезжиривают и делают на нем мазки микроорганизмов: один - исследуемых клеток, другой - клеток кислотоустойчивых микобактерий. Мазки следует делать тонкими, чтобы клетки равномерно распределялись на поверхности стекла и не образовывали скоплений. Препарат высушивают на воздухе, фиксируют над пламенем горелки (спиртовки) и выполняют следующие действия:

на мазок помещают полоску фильтровальной бумаги;
наносят 2 - 3 капли из капельницы (50 - 75 мкл) основного фуксина Циля (входит в состав набора для окраски по Циль-Нильсену);
подогревают 2 - 3 раза препарат до появления паров (за появлением паров наблюдают, глядя на мазок сбоку, и при их появлении тотчас отставляют препарат в сторону);
охлаждают препарат на воздухе до комнатной температуры;
снимают фильтровальную бумагу;
сливают остаток красителя;
промывают водой;
наносят 2 - 3 капли из капельницы (50 - 75 мкл) 5%-ного раствора серной кислоты (входит в состав набора для окраски по Циль-Нильсену);
выдерживают 10 сек;
промывают водой;
наносят 2 - 3 капли из капельницы (50 - 75 мкл) раствора метиленового синего по Леффлеру (входит в состав набора для окраски по Циль-Нильсену);
выдерживают в течение (3 - 4) мин;
сливают краситель;
промывают водой;
высушивают на воздухе;
микроскопируют с иммерсионной системой.

Учет и интерпретация результатов, полученных на базе набора для окраски по Циль-Нильсену

При строгом соблюдении режима окраски кислотоустойчивые клетки приобретают красный цвет, тогда как некислотоустойчивые - синий. Кислотоустойчивость можно определять у клеток любого возраста.

Условия хранения и транспортировки набора для окраски по Циль-Нильсену

Хранить раствор набора для окраски по Циль-Нильсену плотно закрытым.
Срок хранения набора для окраски по Циль-Нильсену – 1 год.
При нарушении условий хранения, способа приготовления и использования рекламации не принимаются.
В остальных случаях рекламации на качество набора для окраски по Циль-Нильсену направлять по адресу изготовителя:
197101, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14; телефакс (812) 233-17-03, 346-83-87; телефон (812) 325-27-10, 346-83-86;
e-mail: pasteur-dnt@IB7861.spb.edu; веб-сайт: www.dntpasteur.ru.