Принципы трердофазного иммунферментного анализа

• Введение
• Общие этапы в различных вариантах ИФА
• Получение иммуносорбента
  • Методы физической сорбции
  • Методы ковалентного связывания
  • Методы комбинированной сорбции
• Получение специфического комплекса на твердой фазе
  • Типы специфических реакций
    
    • Реакция антиген-антитело
    • Реакция белок А-иммуноглобулин
    • Реакция авидин-биотин
    • Реакция лектин-углевод
    • Реакция С_1q, компонента комплимента с иммунными комплексами
  • Характеристика специфических реакций
    • Влияние величины константы равновесия на чувствительность анализа
    • Кинетика специфических реакций
• Устранение неспецифических взаимодействий на этапе промывки
  • Получение мономолекулярного слоя первого специфического реагента и устранение последующих взаимодействий реагент - твердая фаза
  • Устранение перекрестно реагирующих антигенов
• Способы получения конъюгатов
  • Методы химического связывания
    • Методы периодатного окисления
    • Методы с использованием гомобифункциональных реагентов
    • Методы с использованием гетеробифункциональных реагентов
    • Очистка конъюгатов
  • Методы иммунохимического связывания
    • Последовательное образование фермент-антиферментного комплекса на твердой фазе
    • Предварительное получение фермент-антиферментного комплекса
• Измерение ферментативной активности
  • Основные понятия ферментативной кинетики
  • Факторы, определяющие величину ферментативной активности
  • Эффект иммобилизации конъюгата на иммуносорбенте
  • Типы используемых субстратов
    • Хромофорные субстраты
    • Флуоресцентные субстраты
    • Хемилюминисцентные субстраты
• Интерпретация результатов ИФА
  • Методы выражения концентрации антигена
  • Методы выражения концентрации антител
• Список литературы

Назад