Методы с использованием гетеробифункциональных реагентов
Это наиболее прогрессивная группа методов, основанная на использовании сшивающих реагентов с двумя различными реакционными группировками. Одна из них взаимодействует с амино-группой фермента или специфического компонента. После удаления избытка непрореагировавшего реагента модифицированный белок присоединяется к другому специфическому компоненту за счет взаимодействия второй реакционной группы сшивающего реагента с тиольной группой белка. Это позволяет контролировать каждую стадию реакции и получать конъюгаты заданного молекулярного состава [5].
В качестве таких гетеробифункциональных соединений используют: N-сукцинимидиловый эфир 3-(2-пиридилдитио)-пропионовой кислоты; N-гидроксинимидиловые эфиры различных малеимидных производных.